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结核病实验室检测新诊断技术介绍省结核病参比实验室 杨丹丹;发光二极管荧光显微镜(LED)方法
液基夹层杯技术
线性探针耐多药检测技术(HAIN)
基因芯片耐多药检测技术(GENECHIP)
TB和利福平耐药快速分子鉴定(X-Pert);一、发光二极管荧光显微镜(LED)方法;发光二极管荧光显微镜(LED);发光二极管荧光显微镜(LED); 不需要空调设施
不需要暗室
诊断性能优于标准荧光显微镜
寿命长(~ 15-20,000小时)
荧光染色液有致癌作用,推荐自动染色机。
涂片需避光低温保存。
需加强操作人员的培训和质量控制。
成本低廉,价格低于现有的光学显微镜。
适合县、乡级基层实验室使用。
;二、液基夹层杯技术 ;流程图
痰标本消化灭活 基片的夹层杯
离心 细菌附着在基片 在夹层杯中直接染色 取出基片 于载玻片上
镜检 自动阅片计算机报告系统。
所需仪器设备:普通的抗酸染色液、彭氏杯(专利)、涂片机、KP21型快速干片机、抗酸杆菌自动阅片计算机报告系统。
; ;三、线性探针耐多药检测方法(HAIN);原理:基于分子生物学扩增技术。
rpoB基因突变位点有:4个
Kat基因、inhA基因突变位点有:2个、4个;正确流程;操作步骤;四、结果判读;第15页,共43页。;第16页,共43页。;HAIN和目前常规药敏方法比较;适用范围:
1、TB复合群鉴定。
2、TB菌种鉴定。
3、利福平和异烟肼耐药检测 。
原理:多重PCR扩增和反向杂交来识别。;基因芯片;耐药检测基因芯片;耐药分子诊断的基本原理;第22页,共43页。;第23页,共43页。;第24页,共43页。;第25页,共43页。;第26页,共43页。;第27页,共43页。;第28页,共43页。;第29页,共43页。;第30页,共43页。;第31页,共43页。;第32页,共43页。;操作较复杂。
特异度与灵敏度不高。
基因芯片耐多药检测试剂已获得欧盟体外诊断试剂证书(CE-IVD)。
中国药品食品监督管理局的医疗器械证书。
可以作为临床耐药结核病临床诊断和治疗的依据。 ;五、结核和利福平耐药的快速分子鉴定(x-pert);实验室方法;实验室方法;实验室方法;第38页,共43页。; ; ;讨论 ;讨论;讨论
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