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结核病实验室检测新诊断技术介绍省结核病参比实验室 杨丹丹;发光二极管荧光显微镜（LED）方法 液基夹层杯技术 线性探针耐多药检测技术（HAIN） 基因芯片耐多药检测技术（GENECHIP） TB和利福平耐药快速分子鉴定（X-Pert）;一、发光二极管荧光显微镜（LED）方法;发光二极管荧光显微镜（LED）;发光二极管荧光显微镜（LED）; 不需要空调设施 不需要暗室 诊断性能优于标准荧光显微镜 寿命长（~ 15-20,000小时） 荧光染色液有致癌作用，推荐自动染色机。 涂片需避光低温保存。 需加强操作人员的培训和质量控制。 成本低廉，价格低于现有的光学显微镜。 适合县、乡级基层实验室使用。 ;二、液基夹层杯技术 ;流程图 痰标本消化灭活 基片的夹层杯 离心 细菌附着在基片 在夹层杯中直接染色 取出基片 于载玻片上 镜检 自动阅片计算机报告系统。 所需仪器设备：普通的抗酸染色液、彭氏杯（专利）、涂片机、KP21型快速干片机、抗酸杆菌自动阅片计算机报告系统。 ;　;三、线性探针耐多药检测方法（HAIN）;原理：基于分子生物学扩增技术。 rpoB基因突变位点有：4个 Kat基因、inhA基因突变位点有：2个、4个;正确流程;操作步骤;四、结果判读;第15页，共43页。;第16页，共43页。;HAIN和目前常规药敏方法比较;适用范围： 1、TB复合群鉴定。 2、TB菌种鉴定。 3、利福平和异烟肼耐药检测 。 原理：多重PCR扩增和反向杂交来识别。;基因芯片;耐药检测基因芯片;耐药分子诊断的基本原理;第22页，共43页。;第23页，共43页。;第24页，共43页。;第25页，共43页。;第26页，共43页。;第27页，共43页。;第28页，共43页。;第29页，共43页。;第30页，共43页。;第31页，共43页。;第32页，共43页。;操作较复杂。 特异度与灵敏度不高。 基因芯片耐多药检测试剂已获得欧盟体外诊断试剂证书（CE-IVD）。 中国药品食品监督管理局的医疗器械证书。 可以作为临床耐药结核病临床诊断和治疗的依据。 ;五、结核和利福平耐药的快速分子鉴定（x-pert）;实验室方法;实验室方法;实验室方法;第38页，共43页。;　;　;讨论 ;讨论;讨论