赤芍中赤芍总苷的提取与纯化.pdf

赤芍中赤芍总苷的提取与纯化--第1页 赤芍中赤芍总苷的提取与纯化 一、 项目概述： 赤芍为毛莨科植物芍药 (Paeonia lactiflora Pall．)或川赤芍 (Paeonia veitchii Lynch)的干燥根，赤芍总苷(totalpaeony glycoside，TPG)是其主要 活性成分，主要包括芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷、苯甲酰芍药苷等单萜类 化合物，其中芍药苷、芍药内酯苷含量较高。现代药理研究表明，赤芍总苷具有 广泛的药理作用，主要表现在抑制血小板聚集、抗凝血、抗血栓、抗动脉粥样硬 化等作用。本实验采用高效液相色谱(highperformance liquid chromatography， HPLC)法对工艺过程中芍药苷、芍药内酯苷的含量同时进行测定，对赤芍的提取 纯化工艺进行考察，进而为进一步控制赤芍总苷的质量提供实验依据。 二、 实验目的： 1. 掌握赤芍总苷的提取分离工艺； 2. 掌握高效液相色谱仪的使用原理及操作方法； 3. 掌握大孔吸附树脂分离的原理及操作方法。 三、 实验器材 (一) 仪器 高效液相色谱仪，玻璃柱，旋转蒸发仪，真空干燥器、电子分析天平，高效 液相色谱仪，旋转蒸发仪，超声仪 1000ml 圆底烧瓶，冷凝管，烧杯、铁架台， 橡胶软管、HPLC、容量瓶 (二) 试剂 ) 大孔吸附树脂 D10l, AB-8；分析纯；95％乙醇、70％乙醇、30％乙醇、芍 药苷对照品、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸、5％香草醛硫酸溶液、L 磷酸 二氢钾溶液、硅胶G；赤芍药材粉末（川芍），柱层析硅胶，正丁醇，2%乙酸铅， 盐酸，淀粉，碘滴定液，蒸馏水 四、实验内容： 赤芍中赤芍总苷的提取与纯化--第1页 赤芍中赤芍总苷的提取与纯化--第2页 （一）赤芍药材的质量检查 根据《中华人民共和国药典》2015 年版一部赤芍项下的项目对赤芍药材进行 质量检查。 1.性状 本品呈圆柱形，稍弯曲，长5—40cm，直径—3cm。表面棕褐色，粗糙，有 纵沟和皱纹，并有须根痕和横长的皮孔样突起，有的外皮易脱落。 质硬而脆，易折断，断面粉 白色或粉红色，皮部窄，木部放射线纹 理明显，有的有裂隙，气微香，味微苦，酸涩。 2.鉴别 1）本品横切面：木栓层为数列棕色细胞。栓内层薄壁细胞切向延长。韧皮部较 窄，形成层成环，木质部射线较宽，导管群作放射状排列，导 管旁有木纤维。薄壁细胞含草酸钙簇晶，并含淀粉粒。 2）取本品粉末，加乙醇10ml，振摇5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml 使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作 为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各4 l，分别 点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：）为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清 晰。供试 品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑 点。 3.检查 1）水分： 按《中国药典》2015 年版项下操作,取本品粉末约1g,平铺于恒重 的扁形称量瓶中,厚度5mm,精密称定,打开瓶盖 100~105℃烘 5 小时,盖好,移至 干燥器中冷却30分钟,精密称定,同样温度下在烘1小时移至干燥器中冷却30分 钟,精密称定。直至连续两次称定重量之差5mg 为止。按减失重量和称样量计算 供试样品中水分含量(%)。 ~