免疫荧光技术的临床应用培训课件.pptVIP

(二)系统性红斑狼疮（SLE） 是一种临床表现有多系统损害症状的慢性系统性自身免疫性疾病，其血清有以抗核抗体为主的大量不同的自身抗体 自身抗体 （1）抗核抗体谱——ANA、抗ds-DNA、抗ENA抗体 （2）抗磷脂抗体 （3）抗组织细胞抗体——抗RBC抗体 抗血小板相关抗体 抗神经元抗体 （4）其它——RF、p-ANCA * 免疫荧光技术的临床应用 (三)皮肌炎/多发性肌炎（PM/DM） 免疫学检查 ANA ENA——抗Jo-1阳性 其它检查——肌酶谱 肌酸磷酸激酶（CPK）: MM-心肌和骨骼肌 MB-心肌 BB-平滑肌和脑内 乳酸脱氢酶（LDH） 谷草转氨酶（AST） 谷丙转氨酶（ALT） 碱性磷酸酶（ALP） * 免疫荧光技术的临床应用 (四)干燥综合征（SS） ANA——阳性率40%~70% ENA——抗SSA抗体阳性率70%~96% 抗SSB抗体阳性率50%~87% 抗α-Fordrin——对于pSS或sSS的诊断有一 定意义，但特异性和敏感性并不理想。 RF——阳性率75%~100% 高球蛋白血症 WBC下降 * 免疫荧光技术的临床应用 (五)系统性硬化病（pSS） ANA——阳性率50%~55% ENA——抗Scl-70阳性率15%~40% 抗着丝点抗体(ACA)阳性 * 免疫荧光技术的临床应用 Tankertanker Design 免疫荧光技术的临床应用 免疫荧光技术的临床应用 免疫荧光技术的临床应用 随着人们生活水平和意识的不断提 高，各种因素的影响，近年来每31个人 中就有一个人在受到自身免疫性疾病的 折磨，临床表现复杂，不易早期发现。 * 免疫荧光技术的临床应用 自身免疫性疾病涉及多学科 （风湿免疫科、内分泌科、血液科、妇产科、皮肤科、肾病科、消化科等等） * 免疫荧光技术的临床应用 自身免疫性疾病涉及多病种 (混合结缔组织病、系统性红斑狼疮、磷脂综合症、原发性系 统性血管炎、韦格纳肉芽肿、坏死性新月体肾小球肾炎、显 微多动脉炎、习惯性流产、干燥综合征、皮肌炎、多肌炎、 原发性胆汁性肝硬化、原发性胆管炎等等） * 免疫荧光技术的临床应用 自身免疫性疾病的共同特征： 患者血清中有多种自身抗体或自身反应性致敏淋巴细胞存在，患者组织器官的病理特征为免疫炎症，用相同抗原在某些动物实验中可复制出相似的疾病模型，多数病因不明，疾病有重叠现象，即一个病人可同时患一种以上自身免疫病，病程一般较长，多迁延为慢性，有遗传倾向。 鉴于自身免疫性疾病的共同特征，通过检测自身抗体可以有效准确的诊断自身免疫性疾病，为临床提供高效准确的诊断依据。　　 * 免疫荧光技术的临床应用 自身抗体检测的开展，不仅让我院在自身免疫性疾病 诊断治疗上有很大的提高，还可为陇东南地区400万人口提 供更准确、更专业的自身免疫性疾病诊断服务。节省患者去 外院检测诊断所花费的时间和费用，使我院在整个地区具有 一定的影响力，也会为医院带来可观的经济效益。鉴于此， 我院完全有必要应用间接免疫荧光技术开展自身抗体项目的 检测。 * 免疫荧光技术的临床应用 2 酶联免疫吸附法（ELISA） 1 间接免疫荧光法（IFA Indirect Fluorescent Assay ） 3 免疫印迹法（IB）Westernblot LIA 4 其它：IDA、RIA等 * 免疫荧光技术的临床应用 间接免疫荧光法实验原理 细胞、组织切片或纯化的、生化性质明确的物质均可作为检测自身抗体或病原体抗体的抗原基质。 如标本为阳性，已稀释血清中的特异性抗体将与包被在固相上的抗原结合。 第二步，已结合的抗体与荧光素标记的抗人抗体结合，然后在荧光显微镜下观察结果。 阳性标本经系列稀释后可测出其滴度。最适稀释因子为3.162（10的平方根），这样，每隔一步就出现一个10的整数倍数（1:10、1:32、1:100、1:320、1:1000、 1:3200, 1:10000等 * 免疫荧光技术的临床应用 间接免疫荧光法检测的特点 特异性高：阳性与阴性标本的荧光强度差别明显。每种已结合的抗体在相应抗原的位置产生典型的荧光模型。 基质中抗原谱