人教版高中生物选修三《单克隆抗体的制备及应用》教学课件.pptx

2.2单克隆抗体的制备及应用 1.传统抗体制备方法及缺陷向动物体内反复注射某种抗原从动物血清中分离所需抗体产量低、纯度低、特异性差（2）缺点：（1）方法：2.单克隆抗体制备思路：每个B淋巴细胞只分泌一种特异性的抗体B淋巴细胞不能无限增殖困难：如何解决这个问题呢？如何解决这个问题呢？一、单克隆抗体的制备克隆B淋巴细胞细胞群单克隆抗体 米尔斯坦科勒B淋巴细胞骨髓瘤细胞（能产生抗体）（能大量增殖）融合细胞（既能产生抗体，又能大量增殖）一个极富创造力的方案： 探究一一、单克隆抗体的制备随机融合后培养基中细胞的类型有哪些？小组合作利用太空泥模拟细胞融合的过程（只考虑两个细胞融合） 探究二已知细胞分裂过程中，合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖，其本身也不能在体外长期存活。 鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但可以在体外无限增殖，如果它的D途径被阻断的话，它会因为不能合成DNA而死亡。一、单克隆抗体的制备资料：如何将杂交瘤细胞筛选出来？ 一、单克隆抗体的制备探究三多孔细胞培养板抗体检测板如何筛选产生所需抗体的杂交瘤细胞？所依据的原理是什么？在单克隆抗体制备过程中，两次筛选的目的和方法是不相同的。注意： 克隆化培养抗体检测第二次筛选(抗原-抗体杂交技术)多种杂交瘤细胞能分泌所需抗体的杂交瘤细胞阳性细胞一、单克隆抗体的制备 （1）作为诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速（如利用同位素标记的单克隆抗体，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等）二、单克隆抗体的应用 二、单克隆抗体的应用（2）运载药物ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成。 ADC的抗体和药物各具有什么作用？ 抗体主要发挥靶向运输作用；药物发挥治疗效应，如杀伤靶细胞。 （3）直接用于治疗疾病实例：利妥昔单抗(美罗华)是一种针对CD20抗原的人鼠嵌合型单克隆抗体，是第一个被FDA批准用于临床治疗的单抗。进入人体后能通过介导抗体依赖的细胞毒性作用、补体依赖的细胞毒性作用和抗体与CD20分子结合引起的直接效应，抑制细胞生长，改变细胞周期以及凋亡等方式杀死淋巴瘤细胞。二、单克隆抗体的应用 1. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞　 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　 ⑤杂交瘤细胞 A． ②④ B．①③⑤　　 C． ①②③④ 　 D．②③ C三、当堂训练 2、下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。（1）_______________技术为制造单克隆抗体开辟新途径。（2）根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于________培养基。（3）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用________________。（4）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_______________特点，又具备B淋巴细胞的_______________特点。动物细胞融合选择灭活的病毒在体外大量增殖分泌特异性抗体