人教教学血红蛋白的提取和分离二.pptxVIP

人教教学血红蛋白的提取和分离二;（一）样品处理及粗提取 1.样品处理 、粗分离、纯化 和纯度鉴定。 2.血浆、、杂蛋白、、柠檬酸钠、、五、生理盐 水、缓慢、低速短时、上清液没有黄色 3.红细胞、等、蒸馏水、甲苯、磁力搅拌器 4.血红蛋白、高速离心、无 、甲苯、白、脂溶 性沉淀、红 、血红蛋白溶液、暗红、破碎物沉 淀、滤纸、脂溶性沉淀、分液漏斗、血红蛋白 溶液 5.无机盐离子、有机小分子、透析袋、磷酸缓冲 液 ;（二）凝胶色谱操作 2.交联程度、膨胀程度和分离范围、得水值、 7.5、蒸馏水、均匀 、气泡、磷酸缓冲液 、 紧密 。 3.管壁、凝胶面、色谱柱底部、5 （三）操作提示 1.白细胞 2.洗脱液、沸水浴、微生物、空气 3.扰乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序 ; 请拿出课本、双色笔、导学案 让我们准备好进行思维的碰撞 ; ;课题3 血红蛋白的提取和分离 ——实验操作要领;蛋白质提取和分离步骤;哺乳 血液;1.洗涤红细胞;2. 血红蛋白的释放;3.分离血红蛋白溶液;;★注意事项★;（三）纯化;2.凝胶色谱柱的填装;3.样品的加入和洗脱;（四）纯度鉴定—电泳;第18页/共30页;第19页/共30页;合作探究 6分钟;展示点评安排;巩固反刍;本堂小结;1.下列有关提取和分离血红蛋白的程度叙述正确的是（ ）多选 A.样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液 B.通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质，此为样品的粗提取 C.可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化 D.可通过SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度;3.样品的加入和洗脱的操作不正确的是　（ ）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 A.加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓 冲液缓慢下降到凝胶面的下面 B.加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内 C.等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口 D.用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端，不要 破坏凝胶面;6.下列操作正确的是（ ） A.分离红细胞时采用低速长时间离心 B.红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可 C.分离血红蛋白溶液是低速短时间离心 D.透析时要用20mmol/l的磷酸缓冲液，透析12h;7.下面关于对血红蛋白提取和分离的样品的处理措施中，正确的是 ( )多 A.采集血样后要高速短时问离心获得血细胞 B.洗涤三次后如上清液仍有黄色，可增加洗涤次数，否则血 浆蛋白无法除净。 C.在蒸馏水和甲苯的作用下，细胞破裂，释放出血红蛋白 D.释放血红蛋白后再经过离心，就可以使血红蛋白和其他杂 质分离开来 ;8.在蛋白质的提取和分离中，关于对样品处理过程中，分析无误的是 ( ) A洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐 B洗涤时离心速度过小，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的效果 C洗涤过程选用0.1%的生理盐水 D透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质下;课堂评价;谢谢观看！