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人教教学课题血红蛋白的提取和鉴定;;课题3 血红蛋白的提取和分离;一、基础知识:;凝胶色谱法;㈠ 凝胶色谱法(分配色谱法):;第7页/共24页;1 、什么是缓冲液?;1 、什么是电泳?;;第11页/共24页;电泳检测结果;二、实验操作;(一)样品处理;透析过程;(二)凝胶色谱操作;(2)凝胶色谱柱的装填; ④洗涤平衡:装填完毕后,立即用缓冲液洗脱瓶,在50cm高的操作压下,用300ml的20mmol/l的磷酸缓冲液(pH为7.0)充分洗涤平衡12小时。注意:1、液面不要低于凝胶表面,否则可能有气泡混入,影响液体在柱内的流动与最终生物大分子物质的分离效果。2、不能发生洗脱液流干,露出凝胶颗粒的现象。
;(3)样品加入与洗脱;练习巩固;2、用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中,关于蛋白质的叙述,正确的是
A 相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质
B 相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质
C 相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质
D 二者根本无法比较;3、使用SDS-聚丙烯酰胺电泳过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于
A 电荷的多少 B 分子的大小
C 肽链的多少 D 分子形状的差异
4、在采血容器中加入柠檬酸钠的目的是
A 调节pH B 维持红细胞的能量供应
C 防止微生物生长 D 防止血液凝固;5、一分子血红蛋白最多可携带的 O2分子数和CO2分子数分别是
A 4、2 B 4、4 C 2、1 D、1、1
6、记住样品处理中的血红蛋白溶液离心后分层顺序自上而下是:
有机溶剂-----脂类物质-----血红蛋白溶液------红细胞破碎物沉淀;谢谢观看!
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