化学生物学荧光探针发光机理.pptxVIP

第1页/共21页化学生物学荧光探针发光机理第2页/共21页关键词：荧光探针 H2O2生物应用第3页/共21页什么是荧光探针？ 荧光探针是建立在光谱化学和光学波导与测量技术基础上，选择性的将分析对象的化学信息连续转变为分析仪器易测量的荧光信号的分子测量装置。 荧光探针受到周围环境的影响，使其发生荧光发射发生变化，从而使人们获知周围环境的特征或者环境中存在的某种特定信息第4页/共21页荧光分子探针的优点灵敏度高选择性好使用方便成本低不需预处理不受外界电磁场影响远距离发光第5页/共21页 荧光分子探针通常由三部分组成：识别基团（receptor）荧光基团（fluorophore）连接体部分（spacer） BODIPY香豆素罗丹明B 1,8-萘二酰亚胺第6页/共21页PETFRETAnal. Chem. 2012, 84, 4915? 4920ICTTEBT J. Am. Chem.Soc. 2012, 134, 1305 ? 1315荧光探针发光机理······TICTOrg. Lett.DOI：10.1021/ol3032889ESIPTInorg. Chem. 2012, 51, 8760? 8774第7页/共21页光 诱 导 电 子 转 移PET（ photo-induced electron transfer）Coordination Chemistry Reviews 2000,205,3–40第8页/共21页分 子 内 电 荷 转 移ICT（ intramolecular charge transfer）Tetrahedron ,69 ,2013, 1700 -1704第9页/共21页荧 光 共 振 能 量 转 移FRET（ fluorescence resonace energy transfer ） 荧光共振能量转移指一个荧光体系含有两个荧光团，一个充当能量供体D，另一个为能量受体A，当用供体D的激发去激发荧光体系时，可以发生从D到A的非辐射能量转移，从而发射出受体荧光团的荧光。荧光共振能量转移发生必须具备以下几个条件：（1）能量供体荧光团D的荧光发射位于短波长处，且发射光谱和能量受体荧光团A的吸收光谱有一定重叠，能量受体能够在能量供体的发射波长处吸收能量；（2）能量供体与能量受体相隔的距离必须远大于它们之间的碰撞直径（有时甚至为70-100?）；（3）能量供体与能量受体还必须以适当的方式排列。 Inorg. Chem. 2013, 52, 743 ? 752第10页/共21页R O SReactive oxygen species 包括氧离子、过氧化物和自由基等有机物和无机物。这些粒子均十分微小，由于存在未配对的自由电子，这些粒子均十分活跃。ROS是正常氧代谢的副产物，并且在细胞信号传导，和保持机体恒常性起很大作用。然而，在时间以及外界环境影响下（例，暴露于紫外线或热源下），ROS的量会急剧增多。引起这种改变的原因有可能是由于明显的细胞结构的损坏。这种表现，被称为氧化应激。ACCOUNT S OF CHEMICAL RESEARCH ,793– 804 ,2011,Vol. 44, No. 9第11页/共21页R O SReactive oxygen speciesACCOUNTS OF CHEMICAL RESEARCH ,793– 804 ,2011,Vol. 44, No. 9第12页/共21页H2O2的检测中国科学: 化学2012 年 第42卷 第12期第13页/共21页H2O2的检测Chem. Commun., 2003, 2728.第14页/共21页H2O2的检测Tetrahedron Letters 49 (2008) 3045–3048Tetrahedron Letters 51 (2010) 1152–1154第15页/共21页H2O2荧光探针生物应用第一个比例性H2O2探针J. Am. Chem.Soc. 2012, 134, 1305 ? 1315第16页/共21页Dual-Wavelength Boronate Probes for Ra-tiometric Peroxide Imaging in Living CellsPMA:全称为Phorbol-12-myristate-13-acetate(PMA)，或12-O-Tetradecanoylphorbol 13-acetate(TPA)，是一种最常用的佛波酯(phorbol ester)。PMA可以结合PKC，并激活PKC，随后导致一系列的细胞响应。PMA可以抑制Fas诱导的细胞凋亡，但又可以诱导HL-60细胞的凋亡。PMA在肝细胞中可以诱导iNOS的表达。PMA可以增强fo