动物细胞工程 .ppt

第一页，共三十八页，2022年，8月28日 动物细胞工程 学习目标 1.简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 2.简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 3.举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。 第二页，共三十八页，2022年，8月28日 一、动物细胞工程常用的技术手段： 动物细胞培养、 动物细胞核移植、 动物细胞融合、 单克隆抗体 （动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础 第三页，共三十八页，2022年，8月28日 二.动物细胞培养 1、动物细胞培养的概念 : 是从动物机体中取出相关细胞,将它分散成单个细胞,放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖． 2、进行动物细胞的培养原理是？(和植物组织培养比较) 进行动物细胞的培养原理：细胞增殖 　　　　　植物组织培养：全能性 第四页，共三十八页，2022年，8月28日 动物细胞培养的过程的酶: ①用胰蛋白酶；或 ②胶原蛋白酶(处理使细胞分散) 动物细胞培养的过程的过程分以下几个阶段: 1.原代培养:直接从有机体取得组织分散成细胞在培养液中的培养（到接触抑制时止），这时培养称为原代培养；（从1～10代） 2.传代培养:分瓶后的培养（从10～50代） ④ 50代以后细胞发生了癌变。 动物细胞 单个细胞 细胞液 原代培养 接触抑制 传代培养 ① ② 3、动物细胞培养的过程： 第五页，共三十八页，2022年，8月28日 动物细胞培养分四个阶段：原代培养（1～10代）→传代培养（10代以后）→细胞株（10～50代）→细胞系（50代以后）， 第六页，共三十八页，2022年，8月28日 问题：什么是细胞株和细胞系，他有什么区别？ 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养）。 第七页，共三十八页，2022年，8月28日 4、动物细胞培养的条件： （1)无菌、无毒的环境 无菌处理 加抗生素：防止污染 更换培养液：防止细菌的细胞代谢产物对细胞体危害 第八页，共三十八页，2022年，8月28日 （2）营养供给： （ 3）适宜的温度： 适宜的pH: （4）气体环境: 和体内基本相同，（葡萄糖、无机盐、氨基酸、维生素、核酸、嘌呤、嘧啶、激素和生长因子 36.5±0.5 7.2—7.4 O2供细胞代谢 CO2维持培养液的pH 第九页，共三十八页，2022年，8月28日 5、培养基的种类 (1)培养基化学成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基 （2)外观物理状态：液体培养基、半固态培养、固态培养基 （3）功能：基础培养基、选择培养基、和鉴别培养基 第十页，共三十八页，2022年，8月28日 6、动物细胞培养技术的用 （1）、 许多有重要价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、克隆抗体等，都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产。 （2）、用取自烧伤病人皮肤的健康细胞进行培养，可以获得大量自身的皮肤细胞，为大面积烧伤的病人移植。 （3）、培养的动物细胞用于检测有毒物质。许多致畸、致癌物质加入培养液后，培养细胞会发生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性。 （4）、医学家培养各种正常的或病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据 第十一页，共三十八页，2022年，8月28日 7、植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目 原 理 培养基 结 果 培养目的 植物组织培养 动物细胞培养 细胞的全能性 细胞的增殖 固体； 营养物质；激素 液体； 营养物质 动物血清等 培育成植株 培养成细胞株或细胞系 快速繁殖，培育无病毒植株等 获得细胞的产物或细胞等 第十二页，共三十八页，2022年，8月28日 8、回答下面的问题： （1）为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ （2）动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ （3）胰蛋白酶的作用 ？能用胃蛋白酶吗？ （4）为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 第十三页，共三十八页，2022年，8月28日 例1．科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示)，请