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革兰氏阳性形成芽孢的细菌;炭疽芽孢杆菌 (B·anthracis); 形态及染色特性 本菌为G +大杆菌,1.0~1.2um×3~5um。无鞭毛,不运动。芽孢椭圆形,位于菌体中央,芽孢囊不大于菌体。可形成荚膜。DNA的G+Cmol%为32.2~33.9。在动物组织和血液中,此菌单在或呈2~5个相连的短链,菌体矢直,相连的两端平截而呈竹节状,围绕以丰厚的荚膜。
; 荚膜具有较强的抗腐败能力,当菌体因腐败而消失后,仍有残留荚膜显示,称为菌影。在猪体内的此菌形态较为特殊,菌体常弯曲或部分膨大,轮廓不清。动物体内的炭疽杆菌只有当暴露接触空气中的氧气之后,方能形成芽孢。 ;;;电镜下的炭疽芽孢;在培养基中,此菌常形成长链,并于培养18~24h后开始形成芽孢。在普通培养基中不形成荚膜,但若在血液、血清琼脂上或在碳酸氢钠琼脂上,于10%~20%CO2环境中培养则形成荚膜。在葡萄糖琼脂上生长的此菌,细胞内有不能被复红着染的球状小体。
;培养特性 此菌为需氧菌,但在厌氧条件下也可生长。可生长温度范围为15~40℃,最适生长温度30~37℃。最适pH为7.2~7.6。营养要求不高,普通培养基中即能生长良好。 ;在普通琼脂上培养24h后,强毒菌株形成灰白色不透明、大而扁平、表面干燥、边缘呈卷发状的粗糙 (R)型菌落。
;;无毒或弱毒菌株形成稍小而隆起、表面较为光滑湿润、边缘比较整齐的光滑 (S)型菌落。在血液、血清琼脂平板上或在碳酸氢钠琼脂上,置于5%CO2环境中培养,强毒菌株可形成圆形凸起、光滑湿润、有光泽的黏液 (M)型菌落,无毒菌株和类炭疽菌仍保持其粗糙型特点。在血琼脂上一般不溶血,但个别菌株也可轻微溶血。
;于普通肉汤中培养24h后,上部液体仍清朗透明,液面无菌膜或菌环形成,管底有白色絮状沉淀,若轻摇试管,则沉淀物徐徐上升,卷绕成团而不消散。在明胶穿刺培养中,细菌除沿穿刺线生长外,四周呈直角放射状生长,整个生长物好似倒立的雪松状。经培养2~3d后,明胶上部逐渐液化呈漏斗状。 ;在含青霉素0.5IU/ml的培养基中,幼龄炭疽杆因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制,形成原生质体相互连接成串,称为“串珠反应”。若培养基中青霉素含量加至10lU/ml,则完???不能生长或轻微生长。这是炭疽杆菌所特有的,可与其他需氧芽孢杆菌鉴别。 ;生化特性;抵抗力;芽孢的抵抗力特别强大,在干燥状态下可长期存活。需经煮沸15~25min,121℃灭菌5~l0min,或160℃千热灭菌lh方被杀死。 ;实验室干燥保存40年以上的炭疽芽孢仍有活力。干燥皮毛上附着的芽孢,也可存活10年以上。牧场一旦被其污染,传染性常可保持20~30年。对于曾经掩埋炭疽兽尸的土地,必须加以 严格控制。开垦后的头1~2年种植黑麦、三叶草等植物,其根系能分泌一种杀死炭疽杆菌的物 质,起到净化土壤的作用。
;堆肥中的炭疽芽孢,需温度升至72~76℃经过4d方才死亡。常用的 消毒剂是新配的20%石灰乳或20%漂白粉作用48h,0.1%升汞作用40min或4%高锰酸钾 l5min。炭疽芽孢对碘特别敏感,0.04%碘液l0min即将其破坏,但有机物的存在对其作用有很大影响。;除此之外,过氧乙酸、环氧乙烷、次氯酸钠等都有较好的效果。皮毛消毒可用加有2%盐酸(可使芽孢软化增强消毒效果)的5%食盐水,于25~30℃下浸泡40h,或于室温20~25℃ 和相对湿度40%~68%的室内,按1:44(W/W)的比例将环氧乙烷与溴甲烷混合,以每立方米空间1.5kg的用量熏蒸24h。
;抗原结构;2、 菌体抗原 有两种,一种是存在于本菌细胞壁及菌体内的半抗原,为d葡萄糖胺、d半乳糖及乙酸所组成的多糖成分。该抗原与细菌毒力无关,但性质稳定,即便在腐败的尸体中经过较长时间,或经加热煮沸甚至高压蒸气处理,抗原性不被破坏。常用的Asoli反应,加热处理抗原依据在此。此法特异性不高,其他需氧芽孢杆菌能发生交叉反应等。 ;3、保护性抗原 是一种胞外蛋白质抗原成分,分子量83000,在人工培养条件下亦可产生,为炭疽毒素的组成成分之一,具有免疫原性,能使机体产生抗本菌感染的保护力。
4、芽孢抗原是芽孢的外膜层含有的抗原决定簇,它与皮质一起组成炭疽芽孢的特异性抗原,具有免疫原性和血清学诊断价值。 ;致病性;;猪
的
咽
炭
疽;人类对炭疽杆菌的易感性介于食草动物与猪之间,一般通过接触病畜尸体材料或污染的畜产品,经消化道、呼吸道或皮肤创伤感染而发生肠炭疽、肺炭疽或皮肤炭疽。还可引发人类脑膜炎、咽喉炭疽和毒血症等。
实验动物中小鼠、琢鼠、家兔和仓鼠均极易感,大鼠则有抵抗力。
;此菌毒力主要与荚膜和毒素有关,它们分别由PXO1和PX2质粒所调控。在入侵体内生长繁殖后,形成荚膜,从而增强细菌抗吞噬能力,使之易于扩散,引起感染
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