10 培养基《农业微生物》教学课件.pptx

现代农业技术专业/教学资源库培 养 基 培养基是人工配制的，适合于微生物生长繁殖或产（medium，media）生代谢产物的营养基质。一、培养基的分类 按对培养基中材料的了解情况分 按培养基的物理状态分 按培养基的功能分 按培养基使用的目的分 二、 配制培养基的原则 营养成分配比、渗透压 、pH值 、氧化还原电位 一、培养基的种类1．按对培养基成份的了解情况划分培养基可分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。 （1）天然培养基(complex medium) 定义：指利用动植物、微生物或其它天然来源的难以确切知道其化学成分的原料所配成的培养基。 特点：培养基化学成分复杂，营养丰富，原料来源充足，价格低廉。 用途：适宜于实验室和大生产之用。 举例：培养酵母和霉菌的麦芽汁培养基属于此类。 实验室常用的天然营养物质（2）合成培养基(synthetic medium) 定义：采用已知化学成分的纯试剂所配成的培养基，也称组合培养基(chemically defined medium)。 特点：这类培养基成分明确，重复性强。 用途：适用于做分类鉴定，生物测定、选种育种等方面的研究。 举例：培养放线菌的高氏一号培养基，培养真菌的查氏培养基。 （3）半合成培养基(semi-synthetic medium) 定义：主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基，也称半组合培养基。即在合成培养基中加入某种天然成分而制成的培养基。 特点：培养基中部分成分清楚，部分成分不清楚。 用途：适合于大多数微生物的培养。大多数培养基都属此类。 举例：营养琼脂（NA）中除含有天然的牛肉膏和蛋白胨外，还有成分明确的氯化钠。 2．根据物理状态划分固体培养基(solid medium) 天然固体基质制成的固体培养基，如马铃薯块、麸皮培养基；二是在液体培养基中添加凝固剂而制成的固体培养基。用于微生物分离、鉴定、计数、测定、保藏等,生产上固体种子培养，某些产品的发酵培养基。 半固体培养基(semi-solid medium) 液体培养基中加入少量的凝固剂而使之呈半固体状态的一类培养基。(0.2～0.7％琼脂)。常用于观察细菌运动特征，噬菌体效价鉴定以及厌氧菌培养等。 液体培养基(liquid medium) 不含任何凝固剂，其组分均匀，呈液体状态，用途广泛。常用于微生物生理代谢的各种研究，也是大规模工业发酵生产上普遍采用的培养基。 凝固剂特点和种类理想的凝固剂应具备以下条件：①不被微生物液化、分解和利用；②在微生物生长的温度范围内保持固体状态；③凝固点的温度对微生物无害；④不会因高温灭菌而受到破坏；⑤透明度好、凝固力强；⑥配制方便，价格低廉。 琼脂和明胶用作凝固剂的性能比较凝固剂微生物利用程度融化温度凝固点化学本质常用量琼脂绝大多数不利用96℃40~45℃聚半乳糖硫酸酯0.5~2%明胶大多数利用（作氮源）25℃20℃动物蛋白5~12%3．按功能划分培养基分成鉴别培养基和选择培养基 （1）鉴别培养基(differential medium) 一类含有某种代谢产物指示剂的培养基。微生物在这类培养基上生长后，分泌的代谢产物与指示剂起反应产生某种明显的特征性变化，根据这种变化将该种微生物与其它微生物区分开来。 伊红-美兰培养基（EMB）可用于鉴别大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等肠道微生物。大肠杆菌能强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，使菌体表面带H+，染上酸性染料伊红，又因伊红与美兰结合，引起菌落被染上深紫色，反射光下呈绿色金属光泽。 鉴别培养基举例 （2）选择培养基(selective medium) 根据某类微生物的特殊营养要求或对某种物理化学因子的抗性而设计出来的一类培养基。 即根据被分离微生物的特性，采用“投其所好、取其所抗”的原则设计的培养基。 以纤维素或石蜡油为唯一碳源的选择性培养基，可以从混杂的微生物群体中分离出能分解纤维素或石蜡油的微生物。 缺乏氮源的选择性培养基可用来分离固氮微生物。 目的：增殖少数 手段：“投其所好”混合样品 选择性培养基 成为中劣势菌优势菌 目的：抑制多数菌 手段：“取其所抗” 选择培养基 基础培养基+嗜好营养物 基础培养基+抑制剂抑制剂： 青霉素（抑制G+细菌） 分离G-细菌 抗生素 氯霉素，链霉素（抑制细菌） 分离酵母菌，霉菌 放线菌酮（抑制酵母，霉菌） 分离细菌，放线菌 结晶紫：抑制G+ 分离G- 染料 胆盐：抑制G+ 分离G- 孟加拉红：抑制细菌、放线菌 分离酵母，霉菌 其它 叠氮化钠：抑制霉菌 分离乳酸菌 10%酚数滴：抑制细菌，霉菌 分离放线菌 用于选择性的物理因素有：温度，氧气，pH值，渗透压等 如何从土样中分离产