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分析实验考核;6号题目:注射液中维生素B12的测定;实验目的;仪器与试剂;B12标准溶液的配制
标准溶液50μg/ml储备液由教师提供。
吸收曲线的绘制
1.将维生素B12标准溶液1cm比色皿中,以蒸馏水为参比溶液,在300-600nm之间自动扫描。
2.测定A-?吸收曲线,从吸收曲线上选择测定B12的适宜波长,一般选用最大吸收波长λmax
(查资料得知大概在361nm+/-1nm)
;绘制标准曲线
1. 在5个50ml的容量瓶中,用10ml吸量管分别吸取1、2ml、3ml、4ml、5ml的B12系列标准溶液,加入蒸馏水稀释至刻度线,摇匀,没有反应不需要静置。
2. 在紫外-可见可见分光光度计上,在所选波长下,用1cm的比色皿,同时测定各溶液的吸光度,绘制A-CB12标准曲线,得出标准曲线方程。
;测定注射液中维生素B12的含量
1.平行取注射液三份,以磨砂轮在瓶颈部划1~2圈,掰开后将每支注射液定量转移至25ml的比色管中。(因为注射液很难倒入到瓶口很细的容量瓶中)加入蒸馏水稀释至刻度线,摇匀。
2.在所选波长下,用1cm的比色皿,测定各溶液的吸光度。根据吸光度找出相应的维生素B12含量。记录相应的维生素B12含量,带入标准曲线方程计算试液中维生素B12的质量浓度(以μg/ml表示)。
;表一:吸收曲线的绘制
表二:标准曲线的绘制
;
表三:试液含维生素B12量的测定
;The end,thank you!;感谢观看!
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