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本发明涉及二氧化硅结合肽介导醇脱氢酶和胺脱氢酶共固定化级联反应制备手性胺的方法;采用重叠延伸PCR技术将二氧化硅结合肽的基因分别插入到介导醇脱氢酶和胺脱氢酶的基因序列的N末端并构建基因工程菌株;利用镍离子金属螯合亲和色谱柱及含高浓度的咪唑缓冲液纯化分离重组蛋白;利用二氧化硅纳米粒子作为固定化酶的载体,将重组蛋白共锚定在SNPs表面得到固定化酶CotB1p‑ADHCotB1p‑AmDH@SNPs;将获得的固定化酶置于含有NAD+和外消旋醇的NH4Cl缓冲液中反应进行手性胺的制备。制得的双酶共固定
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 114369593 A
(43)申请公布日 2022.04.19
(21)申请号 202210113298.1 C12P 41/00 (2006.01)
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