基因工程31载体.pptxVIP

基因工程31载体;基因克隆载体的要求;2.1 质粒;第4页/共50页;质粒都带有一个或多个基因，这些基因的表达常常赋予宿主细胞一些有用的特征。 如，能够存活在含有致死浓度的氯霉素和氨苄青霉素培养基中的细胞，是因为这些细胞内的质粒中携带有相应的抗生素耐药性基因。 实验室中，抗生素耐药性通常作为一种选择性标记(selectable marker)来确认培养物中的细菌是否含有特定的质粒(图2-2)。;第6页/共50页;所有的质粒都至少含有一段可作为复制起点的DNA序列， 因此能够在细胞内独立于宿主细胞本身的复制周期而实现扩增[图2-3(a)]。 小一些的质粒可以利用宿主细胞本身的DNA复制酶来对自身进行拷贝，而一些较大的质粒本身携带有能够编码自身质粒复制所需的专一性酶的基因。;第8页/共50页;整合型质粒或游离型质粒(episome);第10页/共50页;2.1.2 质粒大小和拷贝数;第12页/共50页;2.1.3 接合性与相容性;第14页/共50页;;2.1.4 质粒的种类;;;;2.1.5 细菌外其他生物体中的质粒;2.2 噬菌体;第22页/共50页;噬菌体侵染模式;第24页/共50页;;2.2.2 溶源性噬菌体;第27页/共50页;;第29页/共50页;尽管噬菌体种类繁多， 但只有λ和M13被发现可以用作克隆载体。; λDNA噬菌体;第32页/共50页;; 线形λDNA;;第36页/共50页;;;第39页/共50页;M13-纤维状噬菌体;;;第43页/共50页;这个双链分子不会插入细菌基因组，但会持续复制直到细胞中的拷贝数超过100。;当细菌分裂时每个子细胞都得到一个或多个噬菌体基因组的拷贝，这些拷贝也能够继续复制，以保证每个细胞中的总拷贝数。 新噬菌体颗粒持续组装和释放，每一个被侵染细胞在经过一代复制后都能够产生1 000个新的噬菌体。;第46页/共50页;M13作为克隆载体的吸引力;;2.2.3 病毒作为克隆载体的应用;感谢观看！