层析填料的选择及其装柱技术介绍幻灯片.pptxVIP

层析填料的选择及其装柱技术介绍幻灯片;如何选择填料？;合理衔接不同层析技术;第4页/共60页;凝胶过滤如何选择填料？一、4种主要常用的凝胶类型 ;二．凝胶过滤填料的选择原则;第7页/共60页;第8页/共60页;第9页/共60页;Sephadex LH-20为例;Sephadex LH-20为例;溶剂;离子交换层析如何选择填料？;第14页/共60页;;;;离子交换层析如何选择填料？;离子交换层析如何选择填料？;利用被分离的（生命大分子）物质和特异性配体之间能可逆性结合与解离的原理而建立的层析方法。 分类： 特异性配体亲和层析：配体一般为复杂的生命大分子物质（如抗体、受体、酶的类似物等）。其特点是吸附特异性强，结合力大 通用性配体亲和层析：配体一般为简单的小分子物质（如金属、染料、氨基酸等）。其成本低，具有较高的吸附容量，但分辨率不及前者 ;亲和层析如何选择填料？（亲和吸附介质：基质+配体）;;二、配体的选择 理想的配体应具有以下一些性质： 1) 配体与待分离的物质有适当的亲和力。 2) 配体与待分离的物质之间的亲和力要有较强的特异性。 3) 配体要能够与基质稳定的共价结合，在实验过程中不易脱落。 4) 配体自身应具有较好的稳定性。 根据配体对待分离物质的亲和性的不同，可以将其分为两类：特异性配体（specific ligand）和通用性配体（general ligand）;亲和吸附介质的配基;能用于亲和层析的分子上的基团;亲和介质反应基团;偶联方法;以CNBr活化的琼脂糖凝胶4B为例;疏水层析如何选择填料？;疏水层析填料类型;疏水层析填料选择考虑因素;;反相层析如何选择填料;反相层析介质;反相层析填料常见类型;反相层析填料的选择原则;;较大的孔径 300 ? 质量传递有改善 用于纯化蛋白，大肽及其DNA;硅胶- 硅烷醇- 配基;我们用的POROS R1 50;凝胶的保存 ;实验室层析柱装柱技术介绍; 柱长;理论塔板数;检测柱效;填料装柱前处理;计算柱子的上样体积;装柱一般步骤 ;流速的换算; 操作压力;装柱需要注意的几点;装柱后;装柱小技巧;装柱常见问题及其处理;柱子的清洗;柱子维护及再生;柱子的保存;装柱视频欣赏 视频1(IEX) 视频2(GF);Thanks!;感谢观看!