CART联合移植治疗.pptxVIP

CART联合移植治疗; 复发性白血病诊断标准 （符合下列条件之一） 诱导化疗获得CR的AL患者骨髓原始细胞大于5％但少于20％，经过一疗程标准化疗未获得完全缓解。 诱导化疗获得CR的AL患者骨髓原始细胞大于20％。 髓外出现白血病细胞浸润。;难治性白血病的主要原因;难治性白血病的治疗原则;复发、难治性AML患者的治疗选择 大剂量Ara-C再诱导治疗 中剂量Ara-C为基础的方案（FLAG或联合蒽环、蒽醌类药物）再诱导治疗 二线药物再诱导治疗 临床试验 异基因造血干细胞移植（二线方案获得CR后再移植或直接移植）;虽然化疗治疗儿童急性淋巴细胞白血病取得很好的疗效，70% 以上患者可获得5年以上长期生存，但在成人ALL疗效仍然很差，尤其是复发难治性急性淋巴细胞白血病的患者预后极差，甚至即使接受挽救性造血干细胞移植治疗，大多患者仅能获得短期病情控制，如果是在异基因造血干细胞移植之后复发或无条件接受移植治疗，该类患者基本上处于无药可救境地。;近期CD19嵌合抗原受体技术在治疗儿童和成人复发B-ALL方面初步显示出很好疗效，近两年的ASH会议上均有所报道。为了强调这个领域的重要性，CAR-T疗法成为2014、2015年ASH年会中的一个重点。 这种新型疗法为复发难治性B-ALL患者带来了一线生机，尤其给那些此前各种实验疗法均失败、无药可治的患者带来了希望。; CAR-T细胞治疗恶性肿瘤有多重优势：短时间内扩增肿瘤特异的T细胞群，靶抗原的非HLA依赖，可反复多疗程使用等。但作为是一种刚刚应用于临床的新型治疗方法，还存在很多问题和未确定因素需要进一步研究和探索，包括“CAR-T细胞最基本的质量标准参数的制定和监控，回输的最佳时机和方式，治疗相关不良反应及其控制，以及近期、远期确切的治疗效果等等”。尤其对中国的患者临床疗效如何？;病例选择： 1.1 复发难治性急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者经其他传统治疗手段无效，治疗前确认白血病细胞CD19+。 ;1.2 患者自愿入组参加，依从性好，能全程配合试验观察，一般情况尚好，心、肝、肾功能基本正常，无重症感染，采血时外周血CD3+T淋巴细胞计数必须≥0.8x109/L。;2. 治疗方法： 用???转录病毒载体导入CD19 CAR的自体T细胞（CAR-T-CD19）输注给患者，输注剂量为 5×108~无上限，分3-5次回输。;回输前对体外制备的CAR-T细胞进行质量检测和鉴定： 1）基本指标：数量、活性度、有无病原体等污染。 2）靶抗原转染率和细胞杀伤功能。;RT-PCR检测转染结果;相对定量----Cp值与内参;FCM检测转染结果;回输前T细胞亚群检测;CAR-T细胞回输前1周内，除予以小剂量环磷酰胺(0.3g/M2 iv. -6d,-5d,-4d) 进行预处理帮助删除抑制性淋巴细胞之外（也有患者采用FC），禁用其他一切细胞毒药物和免疫抑制剂。回输时至少由三人（医生、护士和细胞制备技术人员）对患者的姓名、性别、年龄、住院号、细胞培养序列号和质控报告单等资料进行严格核对，确认无误后再行回输，回输过程中密切观察患者情况。;3. 观察指标： 1）安全性，患者接受CAR-T-CD19治疗，可能出现的 各种相关不良反应及患者耐受性。 2）CAR-T-CD19体内清除白血病细胞效能。 3） CAR-T-CD19在体内持续存留的时间。;4. 结果 1）6例成人接受CAR-T-CD19治疗患者的一般情况;4. 结果 2）安全性：所有患者在回输细胞后均出现不同程度的发热，一般均在37 ℃~ 38 ℃，偶然最高可达39℃以上，但均为一过性，无畏寒、寒战、心慌、胸闷等不适，无需特殊处理或仅用物理降温即可退热。第1例患者在回输CAR-T 2周后复查骨髓发现有嗜血现象，无其他严重毒副反应。 ;被巨噬细胞吞噬的成熟红细胞;原始细胞（白血病细胞）;4. 结果 3）临床疗效（反应率）;;第1例：治疗后15d骨髓中的白血病细胞＜ 20%;FCM检测治疗后白血病细胞清除效率;1）2015-06-11 （回输前）;第2例;第2例;第2例;第3例;第32页/共39页;4. 结果 4）CAR-T在体内持续存留时间 第2例CAR-T回输后第60天，骨髓和外周血CR。PB-RT-PCR 可检出CAR-T特异性核苷酸片段。3个月时测不出。; 第4例：CAR-T回输后第30天，骨髓和外周血细 胞学CR。bcr/abl（T315I突变）融合基因 P210 19.3%阳性 PB-RT-PCR 可检出微量CAR-T特异性核 苷酸片段。;讨 论