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本发明提供了谷氨酸棒杆菌CRISPR/Cpf1高效基因组编辑技术,先整合后诱导切割,将重组和切割事件分离,采用双质粒系统pEC‑XK99E衍生质粒表达RecET和Cpf1置于感受态细胞中,兼容的pXMJ19质粒表达crRNA和提供供体DNA分子,提高了供体DNA模板的装载量,解决了谷氨酸棒杆菌大片段整合难题,同时整体提高了基因组编缉效率,为大片段基因组插入提供了可能,也为谷氨酸棒杆菌代谢工程研究和菌株构建提供了技术保障。
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 114540400 A
(43)申请公布日 2022.05.27
(21)申请号 202210183427.4
(22)申请日 2022.02.28
(71)申请人 天津科技
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