生成哑铃形DNA载体的方法.pdfVIP

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2023-05-12 发布于北京
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生成哑铃形DNA载体的方法.pdf

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哑铃形DNA最小载体代表仅由感兴趣的基因表达盒和末端闭合环结构组成的遗传载体。用于小发夹RNA或microRNA表达的哑铃载体体积非常小，这对于细胞传递和核扩散是有利的。用于生成表达小RNA的哑铃载体的常规策略需要克隆相应的质粒载体，该载体随后用于哑铃保护。在这里，我们提出了一种新的无克隆方法，用于生成表达小RNA的哑铃载体，该载体也不需要任何限制性内切酶。该方法包括使用含有感兴趣序列的有义或反义链的引物对通用DNA模板进行PCR扩增，将扩增产物变性和重折叠以形成茎环结构，并使用DNA连接酶将结

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 114616338 A (43)申请公布日 2022.06.10 (21)申请号 202080072623.3 (74)专利代理机构永新专利商标代理有限公司