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本发明公开了一种MccY重组整合工程菌及其构建方法与应用。该MccY重组整合工程菌的构建方法包括如下步骤:(1)将sgRNA片段(SEQIDNO.2)与T载体连接,得到pHsgRNA质粒;(2)将pCas9质粒转化大肠杆菌,并制成感受态细胞;然后将优化后的MccY的修复片段(SEQIDNO.1)和pHsgRNA质粒转入感受态细胞中,经鉴定、培养、连续传代筛选消除双质粒的菌株,得到所述的MccY重组整合工程菌。本发明中构建得到的MccY重组整合工程菌无质粒无抗性基因,无需诱导剂,能够持续高
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 114634945 A
(43)申请公布日 2022.06.17
(21)申请号 202210452692.8 C12N 1/21 (2006.01)
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