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SRY基因在性别鉴定中的应用;2;3;4;5;6;7;磁珠法提取DNA试剂盒
磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠,这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团,能同核酸发生吸附反应。
快速简捷,一般可在36分钟内完成。
· 不用多次漂洗磁珠也可确保高纯度,提取出的基因组DNA OD260/OD280典型的比值达1.7-1.9,
长度可达2 0 k b - 5 0 k b,可直接用于P C R、Southern-blot和各种酶切反应。;;1.样品处理;2.将上述离心管振荡混匀,65 ℃水浴20min,间或混匀,使样品充分裂解。
3.向充分裂解的样品加入400μl Buffer MA和10μl Magicmag beads,振荡混匀10s.
(吸取Magicmag beads之前,先混匀。务必将Magicmag beads加至液面以下)
4.将离心管置于磁力架上,待Magicmag beads完全吸至管壁上之后,吸弃上清,从磁力架取出离心管。
(吸弃上清时,不要吸入Magicmag beads)
;;磁珠法提取DNA;;15;;;(2)每个样品反应体系为25μl。
首先将下列成分预混:
10×PCR缓冲液 5μl
25mM MgCl2 4 μl
2.5mmol/L dNTP 4μl
10 umol/L SRY引物 1 2μl
10 umol/L SRY引物2 2μl
1 U/μl Taq酶溶液 1μl
ddH2O 26μl
共44ul。
将上述成分混合均匀;
分装到2只0.2 ml离心管中(22μl/管);
一管加入3μl男生DNA,另一管加入3μl女生DNA。
;(3)PCR反应条件为:
94℃ 3min
94℃ 30s
50℃ 30s 循环35次
72℃ 30s
72℃ 5min
10℃ ∞
?;;感谢观看!
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