SRY基因在性别鉴定中的应用.pptxVIP

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SRY基因在性别鉴定中的应用;2;3;4;5;6;7;磁珠法提取DNA试剂盒 磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠,这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团,能同核酸发生吸附反应。 快速简捷,一般可在36分钟内完成。 · 不用多次漂洗磁珠也可确保高纯度,提取出的基因组DNA OD260/OD280典型的比值达1.7-1.9, 长度可达2 0 k b - 5 0 k b,可直接用于P C R、Southern-blot和各种酶切反应。;;1.样品处理;2.将上述离心管振荡混匀,65 ℃水浴20min,间或混匀,使样品充分裂解。 3.向充分裂解的样品加入400μl Buffer MA和10μl Magicmag beads,振荡混匀10s. (吸取Magicmag beads之前,先混匀。务必将Magicmag beads加至液面以下) 4.将离心管置于磁力架上,待Magicmag beads完全吸至管壁上之后,吸弃上清,从磁力架取出离心管。 (吸弃上清时,不要吸入Magicmag beads) ;;磁珠法提取DNA ;;15;;;(2)每个样品反应体系为25μl。 首先将下列成分预混: 10×PCR缓冲液 5μl 25mM MgCl2 4 μl 2.5mmol/L dNTP 4μl 10 umol/L SRY引物 1 2μl 10 umol/L SRY引物2 2μl 1 U/μl Taq酶溶液 1μl ddH2O 26μl 共44ul。 将上述成分混合均匀; 分装到2只0.2 ml离心管中(22μl/管); 一管加入3μl男生DNA,另一管加入3μl女生DNA。 ;(3)PCR反应条件为: 94℃ 3min 94℃ 30s 50℃ 30s 循环35次 72℃ 30s 72℃ 5min 10℃ ∞ ?;;感谢观看!

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