植物细胞工程重点内容.docx

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植物细胞工程重点,老师上课时指点的。 题型为:名词讲解,填空,单项选择,判断,简答。 绪论 细胞工程(cellengineering):应用细胞生物学和分子生物学方法,借助工程学的试验方法或技术,在细胞水平上改造生物遗传特点和生物学特点,已获得特定的细胞、细胞产品或再生物体的相关理论和技术方 法的学科。 细胞工程的核心技术:细胞培育与生殖。 目的:获得新形状,新个体,新物质。 为什么细胞工程是现代生物技术的桥梁和纽扣? 细胞工程把蛋白质工程,基因工程,生物制药等学科和代谢工程,动植物改进,组织工程等学科联系在一 起。 细胞工程研究范围: 细胞工程研究范围涉及细胞,组织,器官,胚胎的培育,细胞交融和亚细胞操作技术。 细胞工程与相关学科的关系 1)细胞工程的建立依赖于相关学科理论的发展; 2)细胞工程为生物学研究供应了新的实验系统,进而又促进了生物科学的迅速发展; 3)细胞工程必定与其他的生物技术相结合才能更好的发挥作用。 细胞工程的应用和意义: 1)改进农业生产技术:动植物品种改进与生殖; 2)保护生态环境:生物工业防范化学工业污染;名贵药物的细胞生产保护自然资源; 3)生物医药、生物质料的开发与应用:以生物技术为依赖的新式产业拥有极大的商业潜力,也是本世纪各国 几句竞争的领域之一。 本章小结 现代生物技术是一个综合技术系统; 细胞工程在现代生物技术中起着桥梁和纽带作用; 细胞工程的产生和发展依赖于生物科学相关领域的理论和技术发展; 细胞工程技术在现代农业、医学以及工业生产中拥有宽泛的应用远景。 第一章 基本实验室包括:准备室,无菌室,培育室。 灭菌 (1)接种室灭菌:紫外灯照射(无菌室、超净台);熏蒸灭菌(无菌室);喷雾消毒(超净台;无菌室)。 (2)接种工具、容器的灭菌:干热灭菌或湿热灭菌。在无菌操作时,把镊子、剪刀、解剖刀等浸入95%的酒精 中,使用从前取出在酒精灯火焰上灼烧灭菌。冷却后,马上使用。 (3)培育基:一般用高温蒸汽灭菌。 (4)不耐热类物质的灭菌。过滤除菌:某些激素(如天然生长素IAA、玉米素ZT、赤霉素GA等)、维生素、 抗生素等不耐热或射线照射的物质。 3培育基基本成分:水,无机盐(大量元素和微量元素);有机成分,激素和其他。 培育基其他成分:琼脂糖,活性炭,附加复合成分(碳水化合物,维生素,肌醇,天然复合物)。(注: 加粗字体部分的答案不确定可否这样) 4常用的植物激素:生长素(Auxins);细胞分裂素(Cytokinins);赤霉素(GA)。 生长素/细胞分裂素。高:有利于根的形成和愈伤组织的形成;适中:有利于根芽的分化;低:有利于芽的形成 5常用培育基:MS培育基,White培育基,B5培育基,N6培育基。其中,N6培育基是中国人朱至靑发明的培育 基。 植物离体培育种类:组织培育,器官培育,细胞培育。 外植体取材原则。 依照培育需求选择植物部位; 多年生植物注意树龄和季节; 在不影响培育目的的前提下尽可能选择自然生殖器官作为外植体。 8外植体灭菌:外植体-冲刷整理-杀菌剂灭菌-无菌水冲刷。 外植体无菌办理:组织冲刷-70%酒精浸10~30s-灭菌剂办理-无菌水涮洗。(此步骤应在超净台上完成) (住:这两个知识点忧如说的是同一个意思,大家自己看着办) 本章小结。 细胞工程的核心是无菌操作和培育; 实验室建立在满足技术要求的同时要经济高效和合用;设备配置应依照工作性质而定; 培育基是细胞生长的必需营养,依照细胞种类确定适合配方; 适合的外植体是培育的前提,光照、温度是植物离体培育的基本条件。 第二章 1细胞全能性:一个细胞所拥有的产生完满生物个体的固有能力称之为细胞的全能性。 脱分化:培育条件下使已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程。 再分化:离体条件下,脱分化后拥有分生能力的细胞,再经过细胞分化,重新形成各种组织和器官、形成新个 体的过程。 愈伤组织:由外植体组织增生的细胞产生的一团不定型的分别排列的薄壁细胞。 2 离体培育条件下,细胞全能性的表达是经过细胞 脱分化和再分化实现的。 3 细胞的脱分化分为 3个阶段: 启动阶段:液体蛋白体出现是脱分化的标志; 演变阶段:细胞核向中央搬动,质体演变成原生质体; 终结阶段:细胞回复到分生细胞状态,细胞分裂马上开始。 4细胞脱分化调控的实质就是 G 期细胞回复到分裂周期的调控过程。 0 器官发生方式:先芽后根,先根后芽,芽根同时。 器官发生过程。 经过愈伤组织的器官发生:愈伤组织的形成;生长中心的形成;器官原基及器官形成。 不经过愈伤组织的器官发生:细胞第一次平周分裂;生长中心形成;原初分生组织;芽原基形成。 本章小结。 细胞全能性是细胞工程的基本理论基础; 细胞全能性的表达能力与细胞分化程度相关; 离体培育下细胞全能性表达是经过细胞分化和

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