动物细胞培养和核移植技术上课.pptxVIP

专题2 细胞工程2.2.1 动物细胞培养和核移植技术2.2 动物细胞工程 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？第1页，共20页。 主要技术植物细胞工程技术动物细胞工程技术植物组织培养植物体细胞杂交动物细胞培养动物细胞融合胚胎移植单克隆抗体技术核移植基础第2页，共20页。 资料：烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。第3页，共20页。 一、动物细胞培养（一）动物细胞培养的过程结合图2-16，阅读P44最后一段至P46第一段结束。1、找出关键词并理解它们的含义。2、叙述动物细胞培养的过程。细胞贴壁细胞的接触抑制原代培养传代培养细胞悬液3、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样 最终培养成新个体？ 不能。 动物细胞培养的结果：使细胞数目增多。第4页，共20页。 通常取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官因为其分化程度低、增殖能力强，更容易培养。说明细胞与细胞间的主要物质是蛋白质1. 动物细胞培养对培养的材料有要求吗？3. 用胰蛋白酶处理，组织就会分散成单个细胞，说明了什么？2. 为什么在培养前要将组织分散成单个细胞？成块的组织不利于培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养。4.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，因此必须控制好胰蛋白酶的处理时间。5.人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？保存10代以内的细胞。因为10－50代部分细胞的细胞核型可能发生变化， 有少部分还发生突变向癌细胞方向发展。第5页，共20页。 细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？遗传物质改变遗传物质未改变第6页，共20页。 （二）动物细胞培养的概念（P44） 就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。原理：细胞增殖想一想：动物细胞培养的基本原理是什么？第7页，共20页。 （三）动物细胞培养条件能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？1、无菌、无毒的环境对培养液和培养用具进行无菌处理；在培养液中添加一定量的抗生素;定期更换培养液；2、营养葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等动物血清、血浆3、温度和pH温度36.5±0.5度，pH7.2～7.44、气体环境O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）O2是细胞代谢所必需的。CO2维持培养液的pH。第8页，共20页。 （四）动物细胞培养技术的应用1、生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等；3、用于检测有毒物质及毒性；2、动物基因工程离不开动物细胞的培养；4、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、 药理等方面的研究。阅读P46-47第9页，共20页。 获得细胞 或细胞产物细胞的全能性细胞数目增多一般为植物体培养结果快速繁殖、培育脱毒作物等培养目的葡萄糖、动物血清促生长因子蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较第10页，共20页。 复习：2、叙述动物细胞培养的过程。5、动物细胞培养的条件。1、动物细胞工程常用的技术手段有哪些？3、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官 或组织做动物细胞培养材料？4、为什么培养前要将组织细胞分散成单个 细胞？第11页，共20页。 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 克隆就是无性繁殖，具体地说，是指 一个共同的祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。a.分子水平上：b.细胞水平上：c.个体水平上：1. 什么是克隆？一般指DNA克隆。指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。 指基因型完全相同的两个或一个群体。第12页，共20页。 2、克隆动物能否用类似植物组织培养的方法获得？为什么？目前不能。 因为动物细胞的全能性随着分化程度的提高逐渐受到限制。目前，用动物体细胞克隆的动物，实际上是通过核移植来实现的。 第13页，共20页。 动物体细胞核移植技术1.回忆克隆羊“多莉”的培育过程Ａ母绵羊Ｂ母绵羊乳腺细胞卵细胞早期胚胎卵裂C母绵羊子宫胚胎移植多莉羊分