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本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及重组胱硫醚β‑裂解酶的制备方法及其应用。本发明通过分子克隆技术扩增大肠杆菌胱硫醚β‑裂解酶的目的基因,并将其与质粒pET‑28a(+)连接,并转化至表达宿主E.coliBL21(DE3)中,并成功获得表达菌株EoliBL21(DE3)(PET28a‑CBL),经过IPTG诱导,可使CBL重组蛋白表达,经过His‑tag进行镍亲和层析获得纯度高活性好的CBL重组蛋白,并将其应用于HCY循环酶法试剂盒的开发。实验表明,本发明提供的制备方法可溶性表达量达到350
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 114807199 A
(43)申请公布日 2022.07.29
(21)申请号 202210163462.X C12R 1/19 (2006.01)
(22)申请日 2022.02.2
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