ABO血型分子基础与应用.pptxVIP

ABO血型分子基础与应用第1页/共41页 ABO血型基本知识Landsteiner 1900年发现ABO血型ＡＢＯ是目前35个血型系统中最为重要的一个血型系统４种表型抗原：Ａ、Ｂ、Ｏ、ＡＢABO血型抗原主要分布在红细胞上，同时分布在白细胞、血小板和组织细胞上分泌型ABO血型抗原为半抗原，分布在唾液、血清、尿液、精液和羊水等中ABO血型抗原存在发育的过程第2页/共41页 成人与新生儿ABO抗原数量比较细胞 成人新生儿A1810 000－1170 000250 000－ 370 000A2240 000－ 290 000140 000B610 000－ 830 000200 000－320 000第3页/共41页 ABO血型基本知识ＡＢＯ血型抗原为糖蛋白和糖脂构成的多态性多糖链ABO血型抗原的蛋白结构：前体物质+H物质(L岩藻糖）+/-特异性糖（N-乙酰半乳糖胺/D-半乳糖）第4页/共41页 第5页/共41页 ABO血型鉴定第6页/共41页 ABO亚型发现ABO亚型ABO血型鉴定时正反定型不符正反定型是相符的, 但某些反应的强度较弱 ——没有血液系统的疾病, 正定型在试管法中应该有“ 4 +”强度的凝集, 否则极有可能是ABO亚型 ——反定型, 凝集强度2 +, 甚至仅存在冷反应性不规则抗-A或抗-B, 这也提示有可能存在亚型。通过反定型减弱预判亚型的可靠性远低于正定型减弱第7页/共41页 ABO亚型正定型的凝集强度与凝集状态　A2 亚型与合格的人源抗-A试剂反应, 可以达到4 +, Ax形成的凝集一般≤ 2 +, 混合视野凝集中凝集的红细胞≥ 50%, 通常判定为A3 或B3 型, 混合视野凝集中凝集的红细胞10%, 则通常判定为“Aend”或“ Bend”。部分亚型红细胞和抗体在4 ℃放置10-30 min后, 凝集强度会显著增强第8页/共41页 各种A亚型血清学表现PhenotypeRed cells tested With anti-seraSerum tested with Known red cellsSalivaof secretorsAnti-A-B-AB-A1-HA1A2BO A1V_VV___V_A and HAint+++_V+++++__V_A and HA2+++_V_++Some-times. +_V_A and HA3++mf_++mf_+++Occa-sionally. +_V_A and HAm-/w+_-/w+_V__V_A and HAx-/W+_+/++_VFre-quently +_V_H第9页/共41页 各种弱A亚型的鉴别程序弱凝集 A3/ Ax/ Aend混合外观(Mf）A60A310％ 红细胞呈十分弱的mf凝集Aend只与抗-AB呈弱凝集Ax不凝集吸附放散抗-AAm/ Ay / Ael容易吸附放散抗-AAm分泌型唾液中有一定量的A物质不容易吸附放散抗-AAy分泌型唾液含少量的A物质吸附放散抗-AAel分泌型唾液只含H物质无A物质第10页/共41页 ABO亚型的分布最常见的ABO亚型存在于A型人群中, A型个体大多数属于A1 型, 少数属于Aint、A2 型。第11页/共41页 ABO亚型的分布Aint可以看做是A1 和A2型的过渡型, 数量多于A2 型除去A1、Aint、A2 型之外, 其他ABO亚型相当罕见, 根据现有数据, 在我国约为1.5/1万或略多, 而且B亚型的数量明显多于A亚型类孟买型在我国不同区域人群中的分布比例约为1/8 000— 1/16 000第12页/共41页 ABO亚型的分布第13页/共41页 ABO血型基因ABO位点 9q34.1－9q34.27个外显子，跨越基因组DNA 18kb 外显子1～7 ，28bp ～691bp不等主要编码顺序：exon 6 和 exon 7第14页/共41页 ABO血型基因ABO抗原不是ABO基因的直接产物——A基因：α(1, 3)N-乙酰氨基半乳糖基转移酶——B基因：D半乳糖基转移酶——O基因：无有效的基因产物第15页/共41页 ABO血型基因ABO基因的参比序列：A*101在A1基因的基础上?核苷酸突变?糖基转移酶改变?影响催化活性?抗原改变A和B基因ｃDNA序列有7个碱基不同，其中４个引起氨基酸的替换，分别是176、235、266和268O基因在261位单碱基缺失造成移码突变，终止密码提早出现，其它序列与A相同第16页/共41页 ABO基因在cDNA和氨基酸上的差异A1 allele (A*101) A1 allele (A*102)nt467(C→T)=aa156(pro→leu)B allele nt291(A→G)； nt