成信工环境工程微生物学课件第6章 微生物的生长.pptVIP

活菌数平板计数法：稀释，将菌液作若干次10倍稀释，达8次 左右，取后面的3-5个稀释液个一定量(常1ml)，与适当的固 体培养基混合制成平板；或取0.1ml在固体培养基上均匀涂布； 待菌落形成后，计算菌落数目，看数值有无10倍的关系，取 平均数，换算出相应稀释倍数的活菌数。 活菌数 微生物纯培养物的生长的测定 活菌数 微生物纯培养物的生长的测定 a. 细胞干重测定法：取一定容积的同一培养物相邻两个时间的样品，经相同速度的离心或过滤，然后用无菌水或缓冲液冲洗，1-2次离心或过滤；离心或过滤的样品置80度温度下干燥24小时(有条件可真空干燥)，作后将两组样品用合适的衡器测出各自的重量，比较细胞干重，了解生长情况。 优点是快速而相对准确； 缺点是不能区别细胞死活，要求菌液浓度高 重量法 微生物纯培养物的生长的测定 b.DNA含量的测定 c.含氮量的测定 微生物纯培养物的生长的测定 生理指标法 微生物纯培养物的生长的测定 微生物的环境因子 一、温度 微生物的生长要求有一定的温度范围： 根据细菌最适温度的不同，可把细菌分为： 低温型（5-10℃） 中温型（25-40℃） 高温型（50-80℃） 微生物的环境因子 在高温时，微生物的蛋白质会发生凝固变性，呈不可逆的变性，导致微生物的死亡。 高温灭菌的方法有：灼烧、干热灭菌和湿热灭菌。 高温消毒的方法：煮沸、巴氏消毒法等 温度对微生物的影响 高温的影响 低温下，微生物的代谢活力低，生长缓慢或停止，但不致死。处于低温下的微生物一旦获得适宜的温度，即可恢复活性。 生物实验中冰箱保存生物样品或试剂 温度对微生物的影响 低温的影响 二、pH 微生物的生命活动、物质代谢与pH有密切关系。不同微生物对pH的要求有不同。微生物对pH的要求也存在最高、最低和最适三个点。 常见的四大类微生物中，对pH的最适（范围）要求分别是， 温度对微生物的影响 细菌：6.5-7.5（4-10）；放线菌：7-8（5-10）； 霉菌：3-6（1.5-10）；酵母菌：5-6（1.5-10）。 LOGO 第6章 微生物的生长 主要内容 微生物的生长繁殖 （重点） 生长规律及特点及在污（废）水微生物处理中的应用（重点） 培养方法 纯培养的分离和生长测定（重点） 微生物的环境因子的影响 微生物的生长 一、生长繁殖的概念 微生物的生长繁殖概述 生物个体由小到大的增长，即表现为细胞组分与结构在量方面的增加 生长 指生物个体数目的增加 繁殖 群体生长的实质是包含着个体细胞生长与繁殖交替进行的过程 （一）细菌群体生长规律 把少量的纯种细菌接种到一定量的液体培养基中，在一定的条件下培养，定时去细胞计数，以培养时间为横坐标，以菌数为纵坐标，可以作出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。 细菌的生长曲线 二、生长规律 微生物的生长规律 生长曲线可分为四个时期： 停滞期 对数期 衰亡期 稳定期 微生物的生长曲线 1.停滞期 停滞期的特点： 1.停滞期初：细菌细胞数目不增加； 2.停滞期后：细胞分裂迟缓、代谢活跃 停滞期长短的影响因素： 1.菌种 2.菌龄 3.接种量 4.接种前后培养条件 2.对数期 时代时间G:细菌细胞在生长对数期，每分裂一次所需要的时间。 对数期的特点： 1.代谢活力最强，生长率最高，合成新细胞物质最快 2.死亡率低或几乎不死亡 3.细胞健壮、整齐，群体细胞化学成分、形态和生理等特性比较一致——良好的实验材料 3.稳定期 产生原因？ 稳定期的特点： 1.细胞活力降低， 2.细胞开始储存一些物质； 3.细菌总数最大，可以收获大量的菌体——发酵行业 4.衰亡期 衰亡期的特点： 1.细菌代谢活性降低，细菌衰老并出现自溶； 2.细胞呈现多种形态，有时产生畸形; 3.细胞大小悬殊； 4.有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性反应等。 细菌生长曲线在污（废）水微生物处理中的应用 研究微生物生长曲线的意义： 微生物的生长曲线形象的描述微生物的群体增长规律及其环境中营养浓度的变化情况。微生物生长曲线的研究对科研和生产实践具有重要的意义： 理论：它不仅可以作为控制微生物生长发育及环境因素对微生物影响的理论基础， 工程：而且对生长曲线变化规律及内涵的理解，对废水生物处理工艺的合理设计将具有重要的指导意义。 由于废水生物处理（活性污泥）实际是连续运行，其微生物生长规律不同于分批培养时的规律，它只能是处于生长曲线的某一阶段。 细菌生长曲线在污（废）水微生物处理中的应用 在废水生物处理设计时，根据废水的水质情况(主要是有机物浓度)，可以利用不同生长阶段的微生物处理废水。 （1）高负荷活性污泥法：利用生长上升阶段（对数期）的微