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细胞化学染色第1页/共79页 第三章 细胞化学染色第一节 概 述 基 本 步 骤 第三章 细胞化学染色固 定 显 示 复 染 第2页/共79页 第三章 细胞化学染色第一节 概 述 第三章 细胞化学染色固定物 理 法 化 学 法 干燥固定 火焰固定 蒸汽固定 液体固定 第3页/共79页 第一节 概 述 偶 氮偶 联 法 雪 夫反 应 联 苯胺 法 普 鲁士 蓝反 应 金 属沉 淀法 显 示 第三章 细胞化学染色第4页/共79页 第三章 细胞化学染色 复染的目的在于使各种细胞能显示出来以便于观察。选择复染液的颜色应与有色沉淀的颜色有明显的对比度，即能使细胞结构显示又能清楚地看出细胞化学染色结果。复 染 第一节 概 述 第5页/共79页 临床应 用 第一节 概 述 辅助判断急性白血病的细胞类型 辅助血液系统等疾病的诊断和鉴别诊断 观察疾病疗效和预后 探讨发病机制 第三章 细胞化学染色第6页/共79页 过氧化物酶染色 酯 酶 染 色 苏 丹 黑 染 色 第二节 细胞化学染色 第三章 细胞化学染色过碘酸-雪夫反应中性粒细胞碱性磷酸酶染色酸性磷酸酶染色 铁 染 色 第7页/共79页 第三章 第二节 细胞化学染色一、过氧化物酶（POX）染色【原理】 POX的染色方法有多种，如复方联苯胺法、二氨基联苯胺法、四甲基联苯胺、改良的pereira染色法等等。二氨基联苯胺染色是临床常用的方法。 二氨基联苯胺法：血细胞内的POX，能分解H2O2而释放出新生氧，后者氧化二氨基联苯胺，形成金黄色不溶性沉淀，定位于细胞质内酶所在的部位。 第8页/共79页 第三章 第二节 细胞化学染色一、过氧化物酶（POX）染色【正常血细胞的染色反应】 1.粒细胞系统 分化差的早期原始粒细胞为阴性，分化好的晚期原始粒细胞至中性成熟粒细胞均呈阳性，且随着细胞的成熟，阳性反应的程度逐渐增强；中性分叶核粒细胞呈强阳性，衰老的粒细胞阳性程度减弱甚至呈阴性；嗜酸性粒细胞阳性反应最强，嗜碱性粒细胞为阴性。第9页/共79页 第三章 第二节 细胞化学染色一、过氧化物酶（POX）染色【正常血细胞的染色反应】 1.粒细胞系统 2.单核细胞系统 原始单核细胞呈阴性，幼稚及成熟单核细胞多呈弱阳性，其颗粒细少稀疏，分布不均。 3.其他细胞 淋巴细胞系统、红细胞系统及巨核细胞系统的细胞均呈阴性，浆细胞、组织细胞也呈阴性，吞噬细胞有时呈阳性。 第10页/共79页 1.中性成熟粒细胞，呈强阳性；2.晚幼红细胞，呈阴性；3.单核细胞，呈弱阳性；4.浆细胞，呈阴性 第11页/共79页 第三章 第二节 细胞化学染色一、过氧化物酶（POX）染色成熟中性粒细胞过氧化物酶活性的变化 临 床 意 义是辅助判断急性白血病细胞类型的首选、最重要的细胞化学染色帮助鉴别急性白血病的类型 第12页/共79页 第三章 第二节 细胞化学染色一、过氧化物酶（POX）染色【临床意义】 1.帮助鉴别急性白血病的类型 （1）POX染色是鉴别急性淋巴细胞白血病和急性粒细胞白血病的重要指标。 急性粒细胞白血病时，原始粒细胞可呈阳性。急性淋巴细胞白血病时，原始淋巴细胞和幼稚淋巴细胞均呈阴性。急性单核细胞白血病时，原始单核细胞、幼稚单核细胞多数呈阴性或弱阳性。第13页/共79页 急性粒细胞白血病（M2a) 的POX染色原始粒细胞均呈阳性 第14页/共79页 急性淋巴细胞白血病的POX染色1.中性成熟粒细胞，呈强阳性；其他原始淋巴细胞均呈阴性 第15页/共79页 第三章 第二节 细胞化学染色一、过氧化物酶（POX）染色【临床意义】 1.帮助鉴别急性白血病的类型 （2）急性早幼粒细胞白血病有时需与急性单核细胞白血病鉴别，如果白血病细胞呈过氧化物酶强阳性，应确定为急性早幼粒细胞白血病。 第16页/共79页 急性早幼粒细胞白血病的POX染色１.原始红细胞，呈阴性；其他早幼粒细胞均呈强阳性 第17页/共79页 第三章 第二节 细胞化学染色一、过氧化物酶（POX）染色【临床意义】 1.帮助鉴别急性白血病的类型 （3）急性单核细胞白血病有时需与组织细胞白血病、恶性组织细胞病相鉴别，异常组织细胞的过氧化物酶呈阴性，而白血病性幼单核细胞和单核细胞呈弱阳性。 第18页/共79页 急性单核细胞白血病的POX染色1.中性成熟粒细胞，呈强阳性；2.原始单核细胞，呈阳性；3.原始单核细胞，呈弱阳性；其他原幼单核细胞呈阴性 第19页/共79页 第三章 第二节 细胞化学染色一、过氧化物酶（POX）染