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真菌诊治进展;;;;Edmond et al. Clin. Infect. Dis. (1999). 29:239-244;;78;54.84%;曲霉感染: 日益严重的问题; 非白念珠菌的增多...;;美国血源性念珠菌感染种类分布 (1998-2000);我国念珠菌种类的变化;;临床常见的条件性真菌感染;临床有增多趋势的条件性真菌;;非培养诊断检测方法;β 1,3-D-glucan (葡聚糖); 方法:G试验;β -1,3-D-葡聚糖检测方法;β-1,3-D-葡聚糖 检测范围;Clin Infect Dis 2004;39:199-205;;假阳性原因;假阴性原因;成人急性髓内白血病,慢性淋巴细胞白血病,急性淋巴细胞白血病,骨髓发育不良综合症,非霍奇金淋巴瘤。
疑有内源性真菌内眼炎的患者
术后病重患者
中暑患者
农民肺
Imai K et al.2004,Nihon Kokyuki GakkaiZasshi 42:1024–1029
肺曲霉病患者
卡氏肺囊虫肺炎患者
其他确诊或疑似侵袭性真菌感染的患者
K?dzierska et al. Eur J Clin Microbiol Infect Dis (2007) 26:755–766
;检测曲霉半乳甘露聚糖抗原(GM);
A 酶联免疫吸附法(Platelia Aspergillus-EIA)
(PA-EIA Platelia Aspergillus, Bio-
Rad,Marnes-la-Coquette, France)
欧洲已流行近十年,在美国03年刚被批准。
B 乳胶凝集试验(Latex agglutination)
(LA Pastorex Aspergillus, Bio-Rad,
Marnes-la-Coquette, France)
两种方法比较,前者比后者更有效:
*0.5–1? ng/mL Vs 15?ng/mL。*早5天检测到
Keutgen X et al, Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2007
;曲霉的GM 抗原检测;预处理:
*EDTA作预处理,分解免疫复合物,沉淀蛋白
*加热使免疫复合物失活。
界值确定:
*阳性0.5;阴性0.5;欧美已普遍接受(06年)。
*将界值由1.5改为0.5,敏感性由76.3%提高到97.4%,特异度由97.5%降至90.5%。
结果判读:
*两次阳性可确诊感染。
*重复检测阴性可排除真菌感染。
Johan A et al , Clinical Infectious Diseases 2007; 44:1329–36
;Platelia Aspergillus EIA – 结果判断;GM不同Cutoffs值的敏感性和特异性;*蘸有曲霉孢子的棉花、棉签
*患者样本中儿童比例高(83%):双歧杆菌的脂膜酸可与EB-A2抗体结合
*破损的肠粘膜:不洁饮食携带的GM
*肠外使用β-内酰胺类抗生素:派拉西林、阿莫西林
Alban Aubry,et al, J CM 2006p. 389–394
*细胞毒性药物:e.g.:环磷酰胺
*移植物抗宿主病:存在与抗体结合的其它蛋白
Hamaki et al, Bone Marrow Transplant. 2001 Sep;28(6):633-4
;Vale′ rio R et al, Mycopathologia (2007) 163:191–202
;*抗体多
Raoul Herbrecht et al, Journal of Clinical Oncology, Vol 20, No 7 (April 1), 2002
*抗真菌药:两性霉素B、泊沙康唑、伊曲康唑
通过抑制菌丝生长从而减少GM的分泌。
*感染部位:GM检测的敏感度在局限性感染
比侵袭性感染低:慢性肉芽肿。
*侵血管性弱:菌丝少时
*菌量少;(1)GM检测不仅利于疾病的确诊,也有助于指导用药。
*用药后监测GM可评估药效及预后。
*频率:2次/周。
*适用对象:粒细胞减少、移植、长期用激素的患者
(2)结合G试验可减少假阳性。
(3)结合临床表现及其它辅助检查确诊。
;;GM抗原ELISA检测应用(Platelia试剂盒);曲霉 GM 抗原系列监测;曲霉感染检测的影响因素;检测真菌DNA的PCR试验;;PCR 检测和鉴定
多引物
多样本制备
高敏感度: 1 - 100 cells/ml
pan-fungal PCR
敏
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