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第1页/共31页酵母细胞的固定化公开课第2页/共31页酵母细胞的固定化第3页/共31页在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂,说明酶制剂使用有很多优点,你能举出一些吗?催化效率高、低能耗、低污染等。生产中直接使用酶存在哪些问题?你知道吗?第4页/共31页酶制剂存在的缺陷: 1、通常对等条件非常敏感,容易失活; 2、溶液中的酶很难回收,不能被 ,提高了生产成本; 3、反应后会混在产物中,可能 。强酸、强碱、高温和有机溶剂再次利用影响产品质量第5页/共31页 如果你是工程技术人员,领导要你解决这个问题,你怎么办?固定化酶技术第6页/共31页一、基础知识(一)、固定化酶的应用实例 阅读P49独立思考3分钟后小组合作讨论:1、解决酶应用中存在问题的方法是?2、什么是高果糖浆?使用它有何好处?3、生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么?这种酶有何特点?4、介绍一下反应柱及其优点5、了解高果糖浆生产过程。6、这种方法的优点是什么?第7页/共31页一、基础知识(一)固定化酶的应用实例总结:固定化酶技术的优点:使酶既能与反应物接触,又能与产物分离;固定在载体上的酶可以被反复利用。第8页/共31页 在生产实际中使用固定化酶技术有无不足?如有不足,怎么办?有。一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行,所以操作比较麻烦。可采用固定化细胞技术。包埋法是指将微生物的细胞均匀包埋在不溶于水的多孔性载体中化学结合法是指将酶分子或细胞相互结合或将其结合到载体上物理吸附法是指将酶吸附到固体吸附剂的表面(二)固定化酶技术和固定化细胞技术第9页/共31页概念:利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间的技术。适用于固定化细胞包埋法固定化酶或者固定化细胞分别适用哪些方法?原因?化学结合法适用于固定化酶物理吸附法第10页/共31页思考? 1.从操作角度来考虑,你认为固定化酶技术与固定化细胞技术哪一种方法更容易?哪一种方法对酶活性的影响更小?2.固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶?3.如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应,应该选择哪种方法?4.如果反应物是大分子物质,又应该选择哪种方法?固定化细胞固定化细胞固定化细胞固定的是一系列酶固定化细胞技术固定化酶技术第11页/共31页规律总结:固定化酶酶的种类:一种所需条件:适宜的温度,PH值酶的种类:多种所需条件:适宜的温度,PH值,营养 物质固定化细胞第12页/共31页练习:1.使用固定化细胞的优点是( )。A.能催化大分子物质的水解B.可催化一系列化学反应C.与反应物易接近D.有利于酶在细胞外发挥作用B第13页/共31页2、研究认为,用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂,可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药,与用微生物降解相比,其作用不需要适宜的( )A、温度B、PHC、水分D、营养D第14页/共31页3. 关于固定化酶的叙述不正确的是 ( )。A.既能与反应物接触,又能与反应 物分离B.固定在载体上的酶可被反复利用C.可催化一系列反应D.酶的活性和稳定性受到限制C第15页/共31页思考:用什么方法对酵母细胞的固定化?包埋法 包埋法常用哪些载体? 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等 二、实验操作——酵母细胞的固定化第16页/共31页三、实验操作(一)制备固定化酵母细胞观看视频思考下列问题:(1)制备过程包括哪几个步骤?(2)你认为哪个步骤的操作是最重要的一环?(3)各步骤应当分别注意什么问题?第17页/共31页〖思考1〗活化是指什么?方法?(1)酵母细胞的活化:〖思考2〗在活化酵母的过程中要注意?1、酵母细胞活化时体积会变大,所用容器要大一些,防止活化液溢出;2、选用的干酵母有较强的活性且物种单一;二、实验操作——酵母细胞的固定化第18页/共31页(1)酵母细胞的活化:(2)配制CaCl2溶液:二、实验操作——酵母细胞的固定化第19页/共31页是最重要的环节:(1)酵母细胞的活化:如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。(2)配制CaCl2溶液: (3)配制海藻酸钠溶液:(浓度要适宜?)注意事项:加热时要用小火,或者间断加热(目的?)二、实验操作——酵母细胞的固定化第20页/共31页(1)酵母细胞的活化:(2)配制CaCl2溶液:(3)配制海藻酸钠溶液:必须将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温才能与酵母细胞进行混合。为什么?搅拌的目的?(4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合:二、实验操作——酵母细胞的固定化第2
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