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网织红细胞计数第1页/共29页第2页/共29页 网织红细胞计数网织红细胞(reticulocyte,Ret或RET) 是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段的细胞,体积略大于成熟红细胞。网织红细胞是有核 红细胞刚刚脱去核的阶段,仍属未完全成熟红细胞,胞质中尚残存嗜碱性物质核糖核酸,经碱性染料(煌焦油蓝、新亚甲蓝)活体染色后,嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒,呈现点状或线网状结构,故名网织红细胞。第3页/共29页 血细胞的发育过程 第4页/共29页第5页/共29页红细胞的发育过程 红细胞在骨髓中生成,至发育成熟为成熟红细胞经历了不同阶段:造血干细胞、原始红细胞、早幼红细胞、中幼红细胞、晚幼红细胞、网织红细胞,最后发育为成熟红细胞。 随着红细胞的成熟,RNA含量逐渐减低,至完全成熟后消失或接近消失,即红细胞中网状结构越多,表示细胞越幼稚。第6页/共29页二、 红细胞系1.原始红细胞 a. 胞体:d:15-20μm,圆形或椭圆形,边缘常有钝角状或瘤状突起。 b. 胞浆:量少,深蓝色(油墨蓝),不透明,无颗粒,核周淡染(鱼肚白)常有伪足。 c. 胞核:圆形,居中或稍偏于一旁,染色质呈细致颗粒状。 核仁1-2个,大小不一,染浅蓝色。第7页/共29页图 原始红细胞第8页/共29页二、 红细胞系2. 早幼红细胞 a. 胞体:d:15-18μm,圆形或椭圆形。 b. 胞浆:量多,蓝色,不透明,仍有瘤状突起,核周淡染区 。 c. 胞核:圆或椭圆形,居中或稍偏位,染色质浓集呈烟丝状或粗密的小块,较原红粗糙,核仁模糊或消失。 第9页/共29页图 早幼红细胞第10页/共29页二、 红细胞系 3. 中幼红细胞 a. 胞体:d:8-15μm,圆形。 b. 胞浆:不同程度的嗜多色 性:灰蓝色、灰色、灰红色。 c. 胞核: 圆形或椭圆形,核染色质凝聚成条索状或块状,有明显空隙,如打碎墨砚感。核仁完全消失。第11页/共29页图 中幼红细胞第12页/共29页二、 红细胞系 4. 晚幼红细胞 a. 胞体:d:7-10μm,圆形 。b. 胞浆:量多,浅灰,浅红色或同成熟红细胞染色(血红蛋白化)。 c. 胞核:圆形,居中或偏位,核染色质凝聚成块状。 第13页/共29页图 晚幼红细胞第14页/共29页二、 红细胞系5.网织红细胞胞体直径7-8μm,活体染色后,胞质中出现蓝绿色或深蓝色网点状结构,Ⅰ型Ⅱ型Ⅲ型Ⅳ型第15页/共29页二、 红细胞胞体直径7-8μm,双凹圆盘状,粉红色,边缘较深,中央较淡。第16页/共29页Heilmyer根据其发育阶段分五型:O型(有核网织红细胞):仅见于正常骨髓Ⅰ型(丝球型):存在于正常骨髓Ⅱ型(网型):大量存在于骨髓Ⅲ型(破网型):仅有少量释放到周围血Ⅳ型(点粒型):多见于正常周围血。第17页/共29页 新亚甲蓝染色第18页/共29页有内含物的红细胞:网织红细胞(煌焦油蓝活体染色),见丝球型、网型、破网型、点粒型网织红细胞。第19页/共29页第20页/共29页 美蓝染色第21页/共29页煌焦油蓝染色 第22页/共29页【检测原理】手工法 :在光镜下计数至少1000个红细胞分布区域内的Ret就可得到Ret的百分率。网织红细胞计数仪法:用荧光染料使含RNA的网织红细胞着色,用流式细胞术计数并计算出网织红细胞百分比。血液分析仪法:必威体育精装版型的血液分析仪,采用流式细胞法也可对RET作分类计数 第23页/共29页【方法学评价】手工法 :具有操作简便、成本低的优点 ;但该法操作烦琐、工作量大,且影响因素多、重复性差的缺点网织红细胞计数仪法:流式细胞术Ret计数法可提供Ret绝对值、高荧光强度、中等强度和低荧光强度网织红细胞百分率(LFR)等多种参数。临床应用价值更大。血液分析仪法:提高了检测的灵敏度、精密度和检测速度。但本法成本高,假阳性增高,其检验结果的准确性并不十分理想。无法完全取代手工计数法。第24页/共29页【质量控制】采血后及时测定 染液用量要适宜掌握网织红细胞的判定标准 定期进行室内质量考核和室间质量评价 第25页/共29页?报告方式成人初生儿?分数0.005~0.0150.02~0.06百分比0.5%~1.5%2%~6%绝对值×109/L24~843个月后达成人水平【参考值】网织红细胞计数参考值 相对值第26页/共29页【临床意义】★评价骨髓的造血功能 (1)网织红细胞增多:表示骨髓造血 功能旺盛,各种增生性贫血时均可增多, 如急性失血、溶血性贫血。 (2)网织红细胞减少:再生障碍性贫血,通常 低于0.5%,临床将网织红细胞绝对值低 于15×109/L,作为急性再生障碍性贫血 的诊断指标之一。第27页/共29页【临床意义】★评价疗效 (1)观察贫血疗效:缺铁性贫血,巨幼细胞性贫血治疗 过程中,如网织红增高(2~3天后开始上升,7~
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