机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立.pptxVIP

第1页/共20页机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立第2页/共20页 急性肾衰竭动物模型的建立 第3页/共20页【实验目的】 1.学习复制急性肾衰竭动物模型的方法 。 2.观察急性肾衰竭时机体的典型表现及血酐水平的变化。 3.掌握急性肾衰竭的概念及发病机制 。第4页/共20页【实验原理】急性肾功能衰竭 指各种原因在短期内引起肾脏泌尿功能急剧障碍，以致机体内环境出现严重紊乱的病理过程，临床表现有水中毒、氮质血症、高钾血症和代谢性酸中毒等 急性肾功能不全的分类 根据病因学，临床上将急性肾功能不全分为肾前性、肾性、肾后性三种。第5页/共20页急性肾功能的发病机制肾缺血肾中毒血流动力学异常肾小管损伤滤过膜受损皮质缺氧髓质充血肾小管阻塞原尿反漏滤过系数外髓部供氧 GRF 少尿【实验动物】第6页/共20页 健康家兔，雄性，体重1.5~1.8Kg第7页/共20页【实验器材和药品】 20%乌拉坦溶液、庆大霉素注射液（1ml:4万单位）、150U/ml肝素、0.9%生理盐溶液、苦味酸 BL-420F实验系统、哺乳动物手术器械一套、动脉导管、动脉夹、膀胱导尿管、注射器（2ml、5ml）、皮头针一套、水浴箱、离心机、丝线 第8页/共20页【实验步骤】家兔称重、分组---体重相似为一组，并且实验组和对照组体重相同或相似↓剪去颈部和上腹部毛、麻醉--- 20%氨基甲酸乙酯注射液4ml/kg，耳缘静脉注射麻醉↓生理盐水作静脉点滴输液---耳缘静脉滴注↓家兔固定---仰卧位固定↓在麻醉状态下，做颈总动脉插管，并连接到试验系统---取血1mL测血肌酐和在实验系统上读取血压以及记录此时在尿量↓第9页/共20页在麻醉状态下，自耻骨联合上方腹部正中线切开皮肤，切口长4~6cm ↓夹闭肾动脉---沿腹白线打开腹腔，将内脏推向左侧，打开后腹膜，暴露肾蒂，分离肾动脉，实验兔和夹闭肾动脉30分钟，对照组肾脏不夹闭。↓二组家兔耳缘静脉注入庆大霉素4万U/Kg↓每隔10分钟，取一次尿液，测定尿量，并做尿肌酐试验。共取三次。↓第10页/共20页颈总动脉取血，做血肌酐试验↓最后将家兔一并处死，取出肾脏，观察并比较家兔的肾脏。第11页/共20页血、尿肌酐测定方法（见表1）和内生肌酐清除率的计算从颈总动脉取血置盛有肝素的离心管内，离心后取血浆，按下表进行实验。 表1 血浆和尿液肌酐含量测定 试剂（ml）标准管S标准空白管S0测定管R测定空白管R0肌酐标准液0．250．25--血浆或尿液--0．2500．250血浆或尿液0.5-0.5-空白苦味酸-0.5---第12页/共20页计算：第13页/共20页【观察项目】表2 处理前和处理后对照组家兔各指标变化组 血压 呼吸 尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 内生肌酐清除率别 （mmHg) （滴/分） （次/分） （ %） （%） （%） 处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后1兔2兔3兔4兔5兔6兔第14页/共20页表3 处理前和处理后实验组家兔各指标变化组 血压 呼吸 尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 内生肌酐清除率别 （mmHg) （滴/分） （次/分） （ %） （%） （%） 处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后7兔8兔9兔10兔11兔12兔第15页/共20页【预期实验结果】 二组家兔兔子血压升高，呼吸加深加快，心率加快，尿量减少，血/尿肌酐的浓度增高，内生肌酐清除率升高，各项症状明显易于测定。第16页/共20页正常肾脏切面图第17页/共20页急性肾衰竭肾脏切面图第18页/共20页急性肾衰竭镜下图毒素引起的肾小管坏死通常弥散性累及肾小管，而由缺血（如心衰引起的严重低血压）引起的肾小管坏死则成片状受累。第19页/共20页左颈总动脉胸骨舌骨肌迷走神经胸锁乳突肌颈内静脉【注意事项】 1.选择体重相差不超过250g的家兔进行对照 2.注意麻醉药的剂量与注入剂量、观察麻醉情况。 3.专人测定血/尿肌酐 4.颈总动脉插管5.肾脏结扎线置于肾动脉处，避免勒破肾脏6.每项生化检验所加入试剂的用量要准确第20页/共20页感谢您的欣赏