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本发明提供一种靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列及其筛选方法,通过设计CRISPR序列,制备包含目标基因的PCR扩增产物并将其与载体连接,再通过体外转录方法制备sgRNA,将所述sgRNA、所述包含目的基因的质粒和Cas9蛋白显微注射斑马鱼受精卵,以斑马鱼受精卵作为反应器筛选靶向敲除斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列。本发明首次以斑马鱼受精卵作为反应器筛选出编辑斑点叉尾鮰zbtb38基因的sgRNA序列,特异性强且敲除效率高,敲除流程简单快捷,为后续解析斑点叉尾鮰zbtb
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112342214 A
(43)申请公布日 2021.02.09
(21)申请号 202011253224.5
(22)申请日 2020.11.11
(71)申请人 江苏省淡水水产研究所
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