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CRISPRCas9基因编辑操作步骤及详细说明
议设置对照组和空白组;
4.加入0.5 mL完全培养基,37℃,5% CO
2
孵育24小时;
5.移去病毒液,加入完全培养基,继续孵育24小时;
6.加入筛选药物(如Puromycin)进行筛选,维持稳定转染细胞株。
四、基因编辑验证
1.提取基因组DNA,PCR扩增目标序列,进行限制性酶切或测序验证;
2.提取总RNA,进行qPCR验证;
3.提取蛋白,进行Western Blot验证。
小幅度改写:
CRISPRCas9是一种基因编辑技术,下面将详细介绍其操作步骤及实验材料与方法。
第一步是细胞培养,我们使用含10% FBS的DMEM培养
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