ET和COX在软骨肉瘤细胞中的高表达致细胞迁移百替生物.pptxVIP

ET和COX在软骨肉瘤细胞中的高表达致细胞迁移百替生物第1页/共22页第2页/共22页Introduction软骨肉瘤 软骨肉瘤是一种高度恶性肿瘤，有很强的局部侵入和远程转移能力。内皮素-1（ET-1） 内皮素（endothelin，ET）是调节心血管功能的重要因子，?对维持基础血管张力与心血管系统稳态起重要作用，广泛存在于各种组织和细胞中。环氧酶（COX） 是前列腺素(PGs)合成所必须的酶,也是PGs合成初始步骤中的关键性限速酶。有两种同工酶，COX-1和COX-2，COX-1是生理性酶，COX-2是诱导酶或病理性酶。第3页/共22页Methods 细胞培养和转染移行实验损伤修复移行IHC、WB、qRT-PCR、ChipsiRNA和突变体转染报告基因分析体内肿瘤异种移植研究第4页/共22页Results1. ET-1通过ET受体调控软骨肉瘤细胞移行A. ET-1的表达情况第5页/共22页B. 不同浓度ET-1作用下软骨肉瘤细胞的移行能力。第6页/共22页C. 不同浓度ET-1作用下细胞损伤修复能力。第7页/共22页D. ET-1受体抑制剂处理后细胞移行能力。BQ123：ETAR受体BQ788：ETBR受体第8页/共22页2. ET-1诱导的细胞中COX-2高表达IHC检测COX-2表达不同时间及浓度ET-1处理后COX-2的表达第9页/共22页C. 不同抑制剂处理的细胞移行能力D. siRNA处理后细胞移行能力COX-2抑制剂：Celebrex、NS-398COX-1抑制剂：Valeryl salicylateCOX抑制剂：Indomethacin第10页/共22页 E. ET-1受体抑制剂处理后COX-2的表达第11页/共22页3. MAPK信号通路参与ET-1调控的细胞移行A. ET-1诱导时ERK、p38和JNK的磷酸化情况。第12页/共22页B. 抑制剂处理细胞后细胞移行情况。D. 抑制剂处理细胞后细胞损伤修复能力。U0126：ERK抑制剂SB203580：p38抑制剂SP600125：JNK抑制剂第13页/共22页C. ERK、p38和JNK突变体处理后细胞移行情况。E. 抑制剂处理后COX-2的表达情况。第14页/共22页4. AP-1参与ET-1诱导的细胞移行和COX-2表达ET-1处理不同时间c-jun的磷酸化情况AP-1抑制剂处理后细胞移行能力第15页/共22页C. siRNA干扰后细胞移行能力D. AP-1抑制剂处理后细胞损伤修复能力第16页/共22页E. AP-1抑制剂处理后COX-2的表达第17页/共22页第18页/共22页5. ET-1过表达减少细胞移行和肺转移第19页/共22页ET-1在软骨肉瘤细胞中高表达，能促进细胞移行，其受体抑制后细胞移行减弱。ET-1的干扰能抑制COX-2的表达和细胞转移。COX-2在软骨肉瘤细胞中高表达，能被ET-1诱导表达，呈时间和浓度依赖，抑制后细胞移行减弱。ET-1能诱导ERK、p38和JNK磷酸化，它们的抑制能减弱细胞移行和COX-2的表达。ET-1能诱导c-jun磷酸化，AP-1和c-jun的抑制减弱细胞移行和COX-2的表达，ERK、p38和JNK的抑制能减少p-cjun进入细胞核。Conclusion第20页/共22页ET-1ETAR、ETBRMAPK信号通路COX-2AP-1C-jun细胞移行Discussion第21页/共22页Thank you ！第22页/共22页感谢观看！