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动物组织核酸的分离鉴定和含量测定.pptxVIP

动物组织核酸的分离鉴定和含量测定.pptx

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动物组织核酸的分离鉴定和含量测定;核酸是一类生物高分子化合物,存在于一切生物体内,是组成细胞的重要成分。它以与蛋白质结合的形式--核蛋白存在于细胞中,是生命的基本物质之一,具有储存、复制生物体遗传信息的功能,也是蛋白质合成不可缺少的物质,因此它对于生物体的生长、遗传、变异等现象起着重要的决定作用 核酸分为两大类--核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA) 核酸完全水解产生嘌呤和嘧啶等碱性物质、戊糖(核糖或脱氧核糖)和磷酸的混合物 核酸部分水解则产生核苷和核苷酸。每个核苷分子含一分子碱基和一分子戊糖,一分子核苷酸部分水解后除产生核苷外,还有一分子磷酸 核酸的各种水解产物可用层析或电泳等方法分离鉴定;DNA和RNA的结构; 基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。 利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提取的目的。在提取过程中,染色体会发生机械断裂,产生大小不同的片段,因此分离基因组DNA时应尽量在温和的条件下操作,如尽量减少酚/氯仿抽提、混匀过程要轻缓, 以保证得到较长的DNA。 不同生物(植物、动物、微生物)的基因组DNA的提取方法有所不同; 不同种类或同一种类的不同组织因其细胞结构及所含的成分不同,分离方法也有差异。;1. 猪肝基因组DNA的分离;核酸分离的一般步骤;核酸分离试剂盒: 可简单、快速地分离得到纯度很高的DNA或RNA,其分离原理是在特定溶液环境下(高盐、低pH)使核酸吸附在固相介质(一般是硅胶膜)上,洗涤去除杂质后,再改变溶液环境使DNA溶解到纯水或TE中,以达到分离、回收核酸的目的。;盐溶法分离DNA和RNA的原理;酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提;实验步骤;2. 核酸的定量和纯度测定;实验方法;3. 脱氧核糖的显色实验;二苯胺显色法原理;DNA标准曲线的制作和样品测定; DNA含量计算;实验报告要求;感谢观看!

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