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3.2体外受精和早期胚胎培养第1页,共15页。目的:良种牛快速大量繁殖第2页,共15页。♀一、试管动物技术♂概念: 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术精子采集卵子采集精子获能卵子体外培养体外受精早期体外胚胎培养本地牛(子宫)试管牛第3页,共15页。一、试管动物技术试管动物技术的三步 第一步:卵子和精子的成熟和受精 第二步:培养为早期胚胎 第三步:胚胎移植第4页,共15页。阅读教材,思考:卵母细胞采集的方法有哪些?采集的卵母细胞都能直接和获能的精子受精吗?1、2、收集精子的方法有哪些?体外使精子获能的方法有哪些?3、一般在什么溶液中完成受精过程?4、教材72页图3-14中,卵母细胞培养的目的? 精子离心处理的目的?(培养成熟,至减Ⅱ中期)(分离精子,便于获能处理)5、发育培养液的成分有哪些?胚胎早期培养的目的?第5页,共15页。二、试管动物技术的过程1、体外受精⑴卵母细胞的采集和培养采集方法:①超数排卵:用促性腺激素处理,从输卵管中冲取卵子。注意:卵子能直接与获能的精子在体外受精。常用对象:实验动物如小鼠、兔,以及家畜猪、羊等②刚屠宰母畜的卵巢中取卵或活体动物卵巢中取卵。注意:要在体外经人工培养成熟后,才能与精子结合完成受精。常用对象:大家畜或大型动物,如牛等第6页,共15页。1、体外受精⑵精子的采集和获能收集的方法:假阴道法、手握法、电刺激法获能的方法:培养法:放入人工配制的获能液中如:啮齿动物、家兔和猪等化学诱导法:放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中如:牛、羊等家畜第7页,共15页。卵母细胞新鲜或解冻的精液卵巢⑶受精精子离心处理卵母细胞培养在获能溶液或专用受精溶液中完成受精过程MⅡ期卵母细胞精子获能处理获能精子体外受精受精标志:透明带与卵细胞膜之间观察到两个极体受精卵培养第8页,共15页。2、胚胎的早期培养两盐、两素、两酸、血清等培养液成分:早期培养的目的:检查受精状况和受精卵的发育能力第9页,共15页。3、胚胎移植胚胎培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植时间不同。牛、羊:桑椹胚或囊胚阶段试管婴儿:8-16个细胞阶段第10页,共15页。方法一:用促性腺激素处理,使其超数排卵,从输卵 管中冲取卵子方法二:从屠宰母畜卵巢中采集 方法三:直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞卵母细胞的采集假阴道法手握法电刺激法精子的获取体外受精受精:获能的精子 +培养成熟的卵子 完成受精条件:受精卵在发育培养液中培养 早期胚胎培养无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等 培养液成分:课内小结第11页,共15页。比较试管动物和克隆动物 试管动物 克隆动物生殖方式技术手段遗传物质遗传规律有性生殖 无性生殖 核移植技术、胚胎移植体外受精胚胎移植来自2个个体主要来自核供体 遵循 不遵循第12页,共15页。巩固练习B1、下列关于试管动物技术的叙述正确的是: A、应用该技术繁育后代的过程属于无性繁殖类型B、应用该技术繁育后代的过程属于有性繁殖类型C、试管动物技术是利用体细胞繁育后代的技术D、试管动物技术培育动物过程全部在体外进行第13页,共15页。B2 、 哺乳动物体外受精的过程是( ) ①卵母细胞的采集 ②精子的采集 ③卵母细胞的人工培养 ④精子的获能处理 ⑤精子与成熟的卵子在受精溶液中共同培养 ⑥用CaCl2处理精子 ⑦用一定浓度的肝素溶液处理卵母细胞 ⑧体外受精 ⑨受精卵培养 第14页,共15页。3、胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术,可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。 (1)从良种母牛采集的卵母细胞,都需要进行体外培养,其目的是 ;从良种公牛采集的精子需______后才能进行受精作用。 (2)在体外培育受精卵时,除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外,还需要提供 气体以维持 。 使卵母细胞成熟 获能 5%的CO2 培养液的pH 胚胎移植 (3)图中过程A称为________, 它在胚胎工程中的意义在于 。(4)研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器,需将目的基因导入牛受精卵,最常用的导入方法是 ;获得转基因母牛后,如果 即说明目的基因已经表达。提高优良母畜的繁殖力 显微注射法 牛奶中含有人类白细胞介素第15页,共15页。
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