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生物碱类成分分析第1页/共89页 中药制剂教研室1.薄层板的制备2.黄连药材的鉴别：2.1对照品溶液的制备：小檗碱作为对照品，制备小檗碱甲醇对照品溶液；2.2黄连对照药材溶液的制备：甲醇回流提取2.3供试品溶液的制备：甲醇浸渍提取2.4点样及展开：按照薄层色谱法试验，在同一薄层板上进行2.5检视：供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同的斑点第2页/共89页 中药制剂教研室1.药味及活性成分的选择 黄连君药 小檗碱主要活性成分2.供试品溶液的制备：提取、纯化（液－液萃取法）制备供试品溶液3.对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的小檗碱对照品溶液，溶于甲醇即得对照品溶液4.固定相即色谱柱的选择：采用ODS柱5.流动相的选择：部分含水溶剂，水用超纯水，有机溶剂采用色谱纯溶剂，并用0.45um过滤膜过滤6.洗脱方式的选择1.如何建立一清颗粒定含量测定分析方法？叙述实验步骤及注意事项。第3页/共89页 中药制剂教研室7.检测器的选择：UVD8.定量分析8.1方法学考察：专属性，线性关系和范围，精密度试验，重现性试验，稳定性试验8.2含量测定：第4页/共89页 中药制剂教研室第五章 中药制剂中各类化学成分分析第一节生物碱类成分分析第5页/共89页 中药制剂教研室大纲要求熟悉生物碱类成分结构特征及理化性质掌握生物碱类制剂定性鉴别常用方法掌握生物碱类制剂定量分析常用方法第6页/共89页 中药制剂教研室问题生物碱类成分的理化性质？含生物碱类成分的中药制剂制备供试品时需考虑的问题？含生物碱类成分中药制剂定性鉴别，以硅胶为载体时，展开系统需注意的问题？HPLC法分析制剂中单体生物碱的含量时，改进流动相的常用方法？第7页/共89页 中药制剂教研室概述定义 生物碱是生物界除生物体必须的含氮化合物（如氨基酸、蛋白质和B族微生素等）之外的所有含氮有机化合物，因其结构中氮原子上的未共享电子对而大多具有碱性。 绝大多数具有显著的生理活性中药材中生物碱多和植物酸性成分结合成盐的状态存在第8页/共89页 中药制剂教研室结构特征及理化性质结构特征 C H O N理化性质物理性状：结晶性固体；液体、小分子固体（挥发性、升华性），多无色溶解性：多样性沉淀反应：生物碱沉淀试剂，定性（蛋白质、多肽、鞣质，避免假阳性）显色反应：纯品，少用于制剂中生物碱分析碱性：多呈碱性，碱性强成盐弱游离，供试品制备及分析方法建立及条件 选择的依据紫外光谱特征：共轭体系，紫外吸收 大多数生物碱在酸性水溶液中可以与某些试剂生成不溶于水的复盐或分子复合物，这类试剂第9页/共89页 中药制剂教研室定性鉴别一般理化鉴别沉淀反应多用：酸性条件，净化处理（除蛋白质、多肽、鞣质），制剂中两种以上含生物碱药材（难说明问题）第10页/共89页 中药制剂教研室马钱子主含生物碱。以番木鳖碱(士的宁) 与马钱子碱(布鲁生) 为主, 主效成分及毒性成分。生物碱以盐的形式存在，加浓氨水使生物碱盐转变成游离碱，易溶于氯仿有机溶剂。地龙含较多多肽、蛋白质等，不溶于有机溶剂。第11页/共89页 中药制剂教研室定性鉴别色谱鉴别1.TLC法：常用载体：硅胶常用展开剂：氯仿、苯及相应极性调节剂硅胶弱酸性，形成盐至Rf值小、拖尾、复斑，碱性展开系统or碱性条件下显色剂：改良碘化铋钾（橘红色）供试品的制备：处方、剂型、存在状态、溶解性、共存成分的性质第12页/共89页 中药制剂教研室第13页/共89页 中药制剂教研室第14页/共89页 中药制剂教研室固体剂型——回流提取第15页/共89页 中药制剂教研室第16页/共89页 中药制剂教研室液体剂型——液液萃取第17页/共89页 中药制剂教研室第18页/共89页 中药制剂教研室固体剂型——大蜜丸第19页/共89页 中药制剂教研室第20页/共89页 中药制剂教研室定性鉴别色谱鉴别2.纸色谱法：显色：含硫酸的试剂不可3.HPLC法：快速、灵敏、微量Rt值法，峰面积 or 峰高加大法（用内标）第21页/共89页 中药制剂教研室含量测定反映中药制剂中含生物碱的真实情况提取、净化、分析测定均要准确方法学考察内容1.提取净化条件的考察2.测定方法与条件的选择3. 定量分析方法验证3.1 专属性 3.2 线性关系考察 3.3 精密度试验3.4 准确度试验 3.5 稳定性试验 3.6 测灵敏度及检测限的测定第22页/共89页 中药制剂教研室含量测定总生物碱含量测定化学分析法范围：处方药味少，内含成分简单的中药制剂酸碱滴定法：生物碱碱性强弱，水/非溶液酸碱滴定法重量法：提取生物碱成沉淀 or 加生物碱沉淀试剂第23页/共89页 中药制剂教研室第24页/共89页 中药制剂教研室酸碱滴定法第25页/共89页 中药制剂教研