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本发明涉及生物技术领域,特别涉及用于DNA循环迭代组装的系统及方法。本发明的循环迭代策略采用四个供体质粒循环利用,采用四个Cas9切割位点和两个筛选标记的设计;本发明中Cas9基因、λRed系统、telN基因是采用质粒形式实现,Cas9基因、λRed系统、telN基因整合到大肠杆菌基因组上可以的达到同样DNA组装的效果。该方法一方面不需要对DNA进行繁琐的体外抽提、酶切、回收等操作,另一方面避免传统大片段DNA组装需要制做原生质体等感受态细胞过程,具有操作简单自动化程度高、成本低等优点。该方法连
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112501191 A
(43)申请公布日 2021.03.16
(21)申请号 202011116869.4
(22)申请日 2020.10.19
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