抗GBM病的进展课件.pptx

抗GBM病的进展 1 抗GBM病的背景 抗GBM病是以循环中出现抗GBM抗体及其在脏器中沉积为特征的自身免疫性疾病 1919: Goodpasture首先报道 1例18岁男性病人，咯血、急性肾衰竭 1967: Lerner等发现抗GBM抗体 1988: Saus等发现3(IV)NC1为主要靶抗原 Goodpasure EM. Am J Med Sci 1919;158: 863-870 Lerner RA, et al. J Exp Med 1967;126:989-1013 Saus J, et al. J Biol Chem 1988;15;263:13374-80 2 少见病 本研究所免疫室： 累计400余例 国际上最大的临床资源库 我国抗GBM病的发生情况 3 病理学检查 光镜：新月体形成 比例高 类型较为一致 荧光：IgG/C3线样沉积 约50%不典型 肾小球严重受损 发生在其他肾小球病基础上 MN Cui Z, et al. Nephron Clin Pract 2005;99:49-55 Cui Z, et al. Renal Failure 2006;28:7-14 不能依赖肾脏免疫病理确诊 4 5 Salant DJ. N Engl J Med 2010;363;4:381-391 6 7 Ea和Eb：cryptic抗原决定簇 8 抗GBM抗体的检测 直接免疫荧光法 肾活检IgG沿GBM线样沉积 间接免疫荧光法 正常肾组织IgG沿GBM线样沉积 ELISA法---靶抗原 人、牛GBM粗抗原 重组的人1---5(IV)NC1 免疫印迹法---靶抗原 IIF法要注意暴露隐藏的抗原位点 纯化抗原三维立体结构 9 1、ELISA法最为常用 2、IIF法和免疫印记法 可用于特殊病人的诊断 白X，未处理，1：32 白X，盐酸胍，1：512 IIF: 暴露隐匿的抗原决定簇 10 11 1、血清阴性的抗GBM病？ 近年就诊4例患者： 肾活检 光镜：新月体性肾炎 IF： 典型IgG线样沉积 ELISA 试剂盒：抗GBM抗体阴性 Jia XY, et al Nephrology 2012 Feb;17(2):160-6. 是否所有抗体都结合到GBM上了？ 血清中是否有抗体？ 如何监测治疗反应？ 12 IIF—经过6M盐酸胍处理 Patients IIF: titer Native G-HCL GP1 1:32 1:512 GP2 1:32 1:512 P1 - 1:32 P2 - 1:32 P3 - 1:8 P4 - 1:8 患者血清中存在抗GBM抗体 抗原决定簇不同? Jia XY, et al Nephrology 2012 Feb;17(2):160-6. 13 M - N +1 1 2 3 4 +2 患者血清识别3链上的立体构象 此类患者血清抗GBM抗体识别暴露的、高度构象性的抗原决定簇 ELISA包被过程？ 还原 煮沸 非还原 煮沸 非还原 不煮沸 M 1 2 3 4 5 B P1：IIF Jia XY, et al Nephrology 2012 Feb;17(2):160-6. 14 2、识别线性抗原决定簇的抗GBM抗体 临床上怀疑抗GBM病 RPGN而依赖透析、少尿 肾活检主要为细胞新月体：IF阴性—RPGN-V 常规血清抗GBM抗体阴性 自身抗体阴性的pauci-immune新月体性肾炎：2/13例 Western blot --还原性条件下：识别线性3(IV)NC1 Unpublished data 检测GBM的线性抗原决定簇 15 N + 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 + M 此类患者主要为T细胞致病? 其B细胞尚未形成针对GBM构象性抗原位点的自身抗体? 抗原：3(IV)NC1 条件：还原，煮沸 Unpublished data 抗GBM病的诊断 加用非传统方法增加了检出率 阐明病生理机制 间接免疫荧光法 其他ELISA法 重组的人1---5(IV)NC1 免疫印迹法 立体构象 线性表位 既可用于诊断 也可用于判断疗效和随访 16 临床表型 Goodpasture病 肺、肾受累 肾损害轻重不一 多为急进性肾炎 可为单纯血尿 1/3合并AMCA 从正常人到ESRD？ Cui et al. Nephron Clin Pract 2005;99:49-55 17 亲和层析： 正常人血清（-） IgG成