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食品安全快速检测技术农药残留检测专题第1页/共41页
项目二 农药残留快速检测回顾上节课内容1.样品制备2.农药、农药残留的概念6/3/2023第2页/共41页
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6/3/2023第4页/共41页
酶抑制率法6/3/2023第5页/共41页
注意事项6/3/2023第6页/共41页
项目二 农药残留快速检测实验二、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测一、实验目的: 学习快速卡法测定有机磷农残快速检验 法及熟悉检验结果评定6/3/2023第7页/共41页
项目二 农药残留快速检测实验原理胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在6/3/2023第8页/共41页
项目二 农药残留快速检测实验试剂固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片磷酸盐缓冲液快速检测仪6/3/2023第9页/共41页
快速检测试纸法6/3/2023第10页/共41页
项目二 农药残留快速检测四、速测卡测定农药残留的主要步骤1)整体测定法剪成1cm碎片,取5g放入带盖瓶,加入10ml缓冲液,振摇50次,静置2min。取1片速测片,用白色药品蘸取提取液,放置10min以上进行预反应速测卡对折,用手捏3min或用恒温3min,使红色药片与白色药片叠合反应,每批设定一个空白6/3/2023第11页/共41页
项目二 农药残留快速检测四.速测卡测定农药残留的主要步骤2)表面测定法(粗筛法)滴2-3滴缓冲液溶液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦取1片速测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上放置10min以上,进行预反应将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合反应。每批测定设一个空白对照6/3/2023第12页/共41页
请注意6/3/2023第13页/共41页
6/3/2023第14页/共41页
项目二 农药残留快速检测五、速测卡测定农药残留的注意事项1)空白对照2)次生物质3)预反应温度4)反应时间5)滴加溶液的数量6)预反应时间一致7)观察结果时间1min6/3/2023第15页/共41页
项目二 农药残留快速检测六、检测结果判断 1、结果判断 结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制(为阳性)、未抑制(阴性)表示。 与空白对照卡比较:白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同为阴性结果。 对阳性结果的样品可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。 2、样品检测结果记录并对检测结果进行评价。6/3/2023第16页/共41页
说明6/3/2023第17页/共41页
知识扩展16/3/2023第18页/共41页
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项目二 农药残留快速检测第二法:酶抑制率分光光度法6/3/2023第25页/共41页
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项目二 农药残留快速检测6/3/2023开机:插上电源,打开仪器背面绿色电源开关,仪器显示开机画面,按画面提示操作,按下回车键,仪器开始自检,时间约1min自检完毕后,仪器进入待机检测状态第36页/共41页
项目二 农药残留快速检测2、试剂配制2.1、缓冲液:取1包缓冲剂加入500mL蒸馏水或纯净水中,搅拌溶解制成磷酸缓冲液(pH7.6), 常温保存。2.2、显色剂:取1瓶显色剂加25mL缓冲液溶解,使用时取100μL,4℃冰箱保存。2.3、底 物:取1瓶底物加12.5mL蒸馏水或纯净水溶解,使用时取100μL,4℃冰箱保存;或取1瓶底物加2.5mL蒸馏水或纯净水溶解 ,使用时取20μL,4℃冰箱保存。2.4、 胆碱酯酶:酶制剂无需配制,可直接取用,使用时取100μL,4℃冰箱保存。6/3/2023第37页/共41页
项目二 农药残留快速检测6/3/20233、样品提取取2g果蔬样品(块茎类取4g),叶菜剪成25px左右见方
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