艾滋病常用实验室检测及临床意义分析.ppt

艾滋病常用实验室检测及临床意义分析 主要内容抗体检测4检测病毒载量检测实验室安全防护 HIV抗体-感染成功抗体转阳诊断艾滋病死亡- 4-8周-出现症状 2-10 年 1年 ? 0.5-2年 ?HIV抗体+ 无症状有症状HIV抗体+艾滋病感染艾滋病毒后的自然发展过程急性感染期潜伏期发病期艾滋病感染者艾滋病患者窗口期 1234急性感染期 1 p24 感染后血液中核酸、抗原和抗体动态变化窗口期暴露天数检测域 感染后病毒载量、4与病程变化规律 艾滋病实验室分类筛查实验室（4检测实验室）确证实验室（4、病毒载量实验室…) 中国实验室网络 国家艾滋病参比实验室 中国性艾中心 艾滋病确认中心实验室 省、市 艾滋病确认实验室 省、市 艾滋病筛查中心实验室 省、市、州、县 艾滋病筛查实验室 省、市、州、县 艾滋病检测点 乡、镇 实验室条件人员:经过专门技术培训,取得培训合格证/上岗证;环境:功能分区,符合生物安全二级要求;仪器设备:按要求配备，满足检测要求。 实验室必须经过资质认证/验收！ 病原体诊断 抗体检测 艾滋病病毒抗原检测（P24） 核酸检测 病毒分离 检测样品血清、血浆尿液抗凝全血（、4、…)（外周血淋巴细胞） 样品的采集和处理 一、样品的采集 最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血(抗凝血)。 唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用样品的采集方法如下： （一）采集样品应按临床采血技术规范及检测试剂盒要求进行。 （二）采集标本时应注意安全，操作应戴双层手套。建议采用真空采血管及蝶形针具，以免直接接触血液。 （三）血清样品采集：用注射器抽静脉血3－5，室温放置1-2小时，待血液凝固或用3000离心15分钟，吸出血清备用。 （四）抗凝血样品采集(免疫功能48测定、血液常规测定、病毒载量）：用加有抗凝剂（K3）的真空采血管或试管抽取静脉血，反复轻摇，常温6小时以内送达实验室检测48或后，再分离血浆和血细胞备用。 （五）血清或血浆样品应存放于-20℃， 短期内（1周）进行检测的样品可存放于2-8℃。 （六）用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃以下，进行病毒 检测的样品如长期（3个月以上）保存应置于-80℃。 二、样品的运送 （一）抗体检测实验室间传递的样品应为血清或血浆，血液常规、4和病毒载量等要求送抗凝血。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。 （二）将试管放入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。如果路程较远或气候炎热，应在2-8℃条件下运送。抗凝血和抗体检测样品路程短可常温送检。包装内需附有送检单。 （三）特殊情况下如需对个别样品进行复测，可以用特快专递形式投寄，但必须将盛样品的试管包扎好，保证不会破碎和溢漏。 三、样品的接收 （一）含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。 （二）核对标本与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。 （三）检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。 （四）因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不可用于荧光方法测试。 抗体检测的目的诊断 确定个体感染状况，包括临床检测、自愿咨询检测、根据特殊需要进行的体检等。血液筛查防止输血传播，包括献血员筛查和原料血浆筛查。监测 了解不同人群感染率及其变化趋势，包括各类高危人群、重点人群和一般人群。 抗体检测的方法筛查试验（包括初筛和复检）：酶联免疫吸附试验（)、化学发光试验、明胶颗粒凝聚试验（）、免疫渗滤试验、免疫层析试验等确证试验：免疫印迹试验（)、条带免疫试验、放射免疫沉淀试验、免疫荧光试验等。 艾滋病抗体确证试验 免疫印迹法（）为目前最常用的抗体确认方法，被公认为判断感染的黄金方法。 艾滋病抗体检测试剂使用条件 筛查或确认试剂必须是1+2混合型，国家卫生部批准或注册，经过国家医药监督管理局批批检合格，临床试剂评估优良，并且在有效期内。 检测要点1、严格按照试剂说明书操作，不得擅自更改。2、注意防止交叉污染。3、严格遵守实验室操作规程。4、认真做好实验记录。 抗体检测结果及结论 抗体筛查结果阴性反应可做抗体阴性报告，筛查试验呈阳性反应，可出具“抗体待复查”报告，不能出抗体阳性报告。筛查阳性反应或可疑阳性反应不能作最终报告通知被检测者，对个体诊断来说,只有经过确证试验，结果阳性才可做抗体