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本发明利用CRISPR/Cas9技术，构建成了ApoE基因缺失斑马鱼，具体步骤包括：1)根据ApoE基因序列，确定ApoE靶位点；2)制备gRNA；3)体外转录Cas9mRNA；4)将Cas9mRNA和gRNA混合，注射到单细胞期斑马鱼胚胎中；5)将F0胚胎饲养至性成熟；6)与野生型成鱼外交，筛选F0；7)选取可产生有效突变的F0自交，筛选F1；8)从F1代突变体中挑选相同突变的雌鱼和雄鱼，杂交得到F2代；9)筛选ApoE基因敲除纯合子即为稳定遗传的ApoE基因缺失斑马鱼。本发明构建的ApoE基
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112695034 A
(43)申请公布日 2021.04.23
(21)申请号 202110044945.3
(22)申请日 2021.01.13
(71)申请人 汪利平
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