实验一微生物培养基的配制灭菌及纯培养.pptxVIP

实验一微生物培养基的配制灭菌及纯培养;一、微生物培养基的配制和灭菌（不做）;1、目 的;2、材 料 和 器 皿;3、方法和步骤;培养基的概念及种类 培养基的配方、配制步骤 ;培养基 是指由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。;细菌： pH 7.0~8.0 放线菌：pH 7.5~8.5 酵母菌： pH 3.8~6.0 霉菌：pH 4.0~5.8 藻类： pH 6.0~7.0 原生动物： pH 6.0~8.0;培养基的种类; 琼脂是最优良的凝固剂，自1880年代开始用于配制微生物培养基以来，至今经久不衰。;实验室的常用培养基： 细菌： 牛肉膏蛋白胨培养基； 放线菌：高氏1号合成培养基培养； 酵母菌：麦芽汁培养基； 霉菌： 查氏合成培养基；;培养基的配制;牛肉膏蛋白胨培养基的配制;;;第16页/共34页;配制步骤：P.78;任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。 常用的灭菌的方法有：干热灭菌、高压蒸汽灭菌、常压蒸汽灭菌、常压间歇式灭菌超高温灭菌、过滤除菌、辐射灭菌、化学药品灭菌等方法。 本实验培养基的灭菌常使用的是高压蒸汽灭菌，它是利用高温湿热空气使菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的。P.90 ;高压蒸气灭菌 一般培养基: 121.3℃, 15-30 min 含糖培养基: 112.6 ℃, 15-30 min ;器皿的灭菌： 干热空气： 160℃， 2 小时 无菌室的消毒： 紫外光 化学药物熏蒸（苯酚；高锰酸钾+甲醛）;二、 微生物的纯培养（微生物的培养特征） ;1、实验目的;2、实验原理;今天接种的菌种：;大肠杆菌 需氧及兼性厌氧。G－短杆菌，周鞭毛，有动力，周身有菌毛。 ;变形杆菌 为革兰氏染色阴性、无芽胞、无荚膜、周身鞭毛、运动活泼、两端钝圆的小杆菌。兼性厌氧。有些种在普通固体培养基上菌落呈迁徙生长。 在自然界中存在极广，水、泥土、阴沟及各种腐败的动、植物中最多，也存在于健康人和动物的肠道中。它们是条件致病菌，在特殊情况下对人致病，如食物中毒、尿路感染、夏季腹泻或其他混合感染。 ;葡萄球菌 是一群革兰氏阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状，故名。在液体培养基的幼期培养中，常常分散，细菌细胞单独存在。代表种有金黄色葡萄球菌（S-taphylococcusaureus）（黄色）、白色葡萄球菌（S．albus）（白色）、柠檬色葡萄球菌（S．citreus）（橙色）。 葡萄球菌无鞭毛，不能运动。无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。 在肉汤培养基中24小时后呈均匀混浊生长，在琼脂平板上形成圆形凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润，不透明的菌落。不同种的菌标产生不同的色素，如金黄色、白色、柠檬色。 ;3、实验操作; 平板接种方法参阅p.129； 斜面接种方法参阅p.8； 液体接种方法参阅p.99； 半固体接种参阅P.49。;（2）培养特征观察 于37℃下培养24h后观察各种菌株在不同的培养基上的培养特征，比较它们培养特征之间的差异(实验报告上的重点内容)。 平板培养特征的描述参阅p.18表2，斜面培养特征参阅P.9，液体培养特征的描述参阅P.100，半固体培养特征的描述参阅P.49-50。 明天中午12:30观察结果并记录。 ;思考题： 某人将培养了5天的革兰氏阳性菌进行革兰氏染色，他很奇怪地发现在油镜下细菌显红色。这是怎么回事？ 张三将已知革兰氏阳性菌和另一株革兰氏阴性菌放在相邻位置进行革兰氏染色，不巧的是他忘记加碘液这一步。在油镜下观察他的玻片时，你认为他会看到什么？为什么？; 实验分组（35班）第一组：王燕萍 赵晓云 孙小慧 胡周燕第二组：何丽庆 屠丽媛 周晓青 方凯莉 第三组：高梦滢 苏小鸥 谢旻昀 计玲燕第四组：陆思琪 赵阳 沈良云 王雪飞第五组：吴燕江 方佳琪 沈京京 朱迎春 第六组：王芳芳 蔡珊珊 杨莹洁 陆丽第七组：廖茹珍 王菲菲 谢枫丹 谢荷艳第八组：周赛赛 俞静 聂清清 楼邢颖第九组：何飞旋 潘勇军 蒋珂 胡健; 实验分组（34班）第一组：叶莉莉 李玲叶 艳菲 徐旭霞第二组：戴丽