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本发明涉及一种稳转表达SpCas9蛋白细胞系的构建方法及其应用，构建方法包括：慢病毒的包装以及纯化，包括HEK293T细胞准备，转染包装质粒，转染培养后收取细胞培养上清，浓缩病毒液；将得到的浓缩病毒感染细胞，包括药物浓度筛选，慢病毒感染细胞，药物筛选，挑取单克隆进行鉴定。采用稳转表达SpCas9蛋白细胞系的构建方法，获得小鼠成肌细胞C2C12稳转表达SpCas9蛋白细胞系和小鼠胚胎干细胞E14稳转表达SpCas9蛋白细胞系，可稳定表达SpCas9蛋白，可作为快速验证工具，用于对设计的SgRNA
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112813031 A
(43)申请公布日 2021.05.18
(21)申请号 202110050861.0
(22)申请日 2021.01.14
(71)申请人 中国医学科学院基础医学研究所
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