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动物细胞培养.pptxVIP

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动物细胞培养;;(一)培养细胞的特性;常用培养容器;贴壁生长细胞传代方法;细胞传一代后,一般要经过以下三个阶段: 1.潜伏期(Latent Phase): 细胞接种培养后,先经过一个在培养液中呈悬浮状态的悬浮期。此时细胞胞质回缩,胞体呈圆球形。接着是细胞附着或贴附于底物表面上,称贴壁,悬浮期结束。各种细胞贴附速度不同,这与细胞的种类、培养基成分和底物的理化性质等密切相关 2.指数增生期(Logarithmic growth Phase): 这是细胞增值最旺盛的阶段,细胞分裂相增多。指数增生期是细胞一代中活力最好的时期,因此是进行各种实验最好的和最主要的阶段。 ;在接种细胞数量适宜情况下,指数增生期持续 3~5天后,随细胞数量不断增多,最后细胞相互接触汇合成片。如培养的是正常细胞,相互接触能抑制细胞的增殖,这种现象称接触抑制(Contact Inhibition)。而恶性细胞则无接触??制现象,因此接触抑制可作为区别正常与癌细胞标志之一。 肿瘤细胞由于无接触抑制能继续移动和增殖,导致细胞向三维空间扩展,使细胞发生堆积(Piled up)。 3.停滞期(Stagnate Phase):细胞数量达饱和密度后,细胞遂停止增殖,进入停滞期。此时细胞数量不再增加,故也称平顶期(Plateau)。停滞期细胞虽不增殖,但仍有代谢活动,继而培养液中营养渐趋耗尽,代谢产物积累、pH降低。此时需做分离培养即传代。 ;细胞生长过程;人微血管内皮细胞株(HMEC-1) 细胞状态特征:多角形或梭形,边界清晰,大小均匀,胞核为圆形或椭圆形,位于细胞中央,汇合后呈典型的铺路石样排列。 ;人口腔皮样癌KB细胞株 细胞状态与特征简述:贴壁生长细胞,呈不规则形状。 ;(二) 培养细胞生长的条件;肿瘤细胞的培养;;;;;细胞培养室 的设备;培养用品的清洗和消毒灭菌;培养用液;培养基;四唑盐(MTT)比色法;操作步骤;感谢观看!

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