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高考生物真题按知识点分类汇编91-生物技术与工程-基因工程-目的基因的检测与鉴定(含解析)--第1页 五年2018-2022高考生物真题按知识点分类汇编91-生物技 术与工程-基因工程-目的基因的检测与鉴定（含解析） 一、综合题 1．（2022·山东·高考真题）某种类型的白血病由蛋白P 引发，蛋白UBC可使P被蛋白 酶识别并降解，药物A可通过影响这一过程对该病起到治疗作用。为探索药物A治疗 该病的机理，需构建重组载体以获得融合蛋白FLAG-P和FLAG-P△ 。P△是缺失特定 氨基酸序列的P，FLAG是一种短肽，连接在P或P△的氨基端，使融合蛋白能与含有 FLAG抗体的介质结合，但不影响P或P△的功能。 (1)为构建重组载体，需先设计引物，通过PCR特异性扩增P基因。用于扩增P基因的 引物需满足的条件是_______、为使PCR产物能被限制酶切割，需在引物上添加相应的 限制酶识别序列，该限制酶识别序列应添加在引物的______ （填“3端”或“5端”）。 (2)PCR扩增得到的P基因经酶切连接插入载体后，与编码FLAG 的序列形成一个融合 基因，如图甲所示，其中“ATGTGCA”为P基因编码链起始序列。将该重组载体导入细 胞后，融合基因转录出的mRNA序列正确，翻译出的融合蛋白中FLAG 的氨基酸序列 正确，但P基因对应的氨基酸序列与P不同。据图甲分析，出现该问题的原因是______。 修改扩增P基因时使用的带有EcoR Ⅰ识别序列的引物来解决该问题，具体修改方案是 ______。 (3)融合蛋白表达成功后，将FLAG-P、FLAG-P△、药物A和UBC按照图乙中的组合 方式分成5组。各组样品混匀后分别流经含FLAG抗体的介质，分离出与介质结合的物 质并用UBC抗体检测，检测结果如图丙所示。已知FLAG-P和FLAG-P△不能降解UBC， 由①②③组结果的差异推测，药物A 的作用是______；由②④组或③⑤组的差异推测， P△ 中缺失的特定序列的作用是______。 试卷第1页，共10页 高考生物真题按知识点分类汇编91-生物技术与工程-基因工程-目的基因的检测与鉴定(含解析)--第1页 高考生物真题按知识点分类汇编91-生物技术与工程-基因工程-目的基因的检测与鉴定(含解析)--第2页 (4)根据以上结果推测，药物A治疗该病的机理是______。 2．（2022·河北·统考高考真题）蛋白酶抑制剂基因转化是作物抗虫育种的新途径。某研 究团队将胰蛋白酶抑制剂（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制剂（StPinlA）的基因单独或共 同转化棉花，获得了转基因植株。回答下列问题： (1)蛋白酶抑制剂的抗虫机制是________。 (2)________是实施基因工程的核心。 (3)利用农杆菌转化法时，必须将目的基因插入到质粒的________上，此方法的不足之处 是________。 (4)为检测目的基因在受体细胞基因组中的整合及其转录和翻译，可采用的检测技术有 ________ （写出两点即可）。 (5)确认抗虫基因在受体细胞中稳定表达后，还需进一步做抗虫的________以鉴定其抗性 程度。下图为三种不同遗传操作产生的转基因棉花抗虫实验结果，据结果分析________ （填“NaPI”或“StPinlA”或“NaPI＋StPinlA”）转基因棉花的抗虫效果最佳，其原因是 ________。 (6)基因突变可产生新的等位基因，在自然选择的作用下，昆虫种群的基因频率会发生 ________。导致昆虫朝着一定的方向不断进化。提此推测，胰蛋白酶抑制剂转基因作物 长期选择后，某些害虫具有了抗胰蛋白酶抑制剂的能力，其分子机制可能