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本发明公开了一种简便的基因缺失突变体的载体构建方法和试剂盒,包括如下步骤:(1)根据目的载体上要缺失的目的基因,设计PCR扩增引物对,上游引物包括:引物5’端部分为目的载体上要缺失的目的基因之前的20~35bp同源臂序列,引物3’端部分为要缺失的目的基因之后的20~35bp同源臂序列;下游引物为上游引物的反向互补序列;(2)目的载体作为模板,进行常规PCR反应;(3)去除PCR反应产物中多余的模板质粒;(4)转化大肠杆菌,得到单克隆菌落,摇菌提取质粒,鉴定得到缺失了目的基因的正确重组质粒。本发明
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112852855 A
(43)申请公布日 2021.05.28
(21)申请号 202110161267.9
(22)申请日 2021.02.05
(71)申请人 中南大学
地址 41
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