一种新的基于重叠延伸PCR的载体构建方法以及试剂盒.pdfVIP

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2023-06-08 发布于四川
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一种新的基于重叠延伸PCR的载体构建方法以及试剂盒.pdf

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本发明公开了一种新的基于重叠延伸PCR的载体构建方法：(1)根据目的基因和目的载体的序列设计第一轮PCR扩增引物对，上游引物5’端部分为目的载体上目的基因插入位置之前的20～35bp同源臂序列，3’端部分为目的基因扩增特异引物；下游引物5’端部分为目的载体上目的基因插入位置之后的20～35bp同源臂序列，3’端部分为目的基因扩增特异引物；(2)用第一轮PCR扩增引物扩增目的基因；(3)回收第一轮PCR产物，以回收产物作为引物，以环形的目的质粒载体作为模板，进行第二轮PCR反应；(4)消化第二轮P

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112852851 A (43)申请公布日 2021.05.28 (21)申请号 202110163385.3 (22)申请日 2021.02.05 (71)申请人北京华青创想教育科技有限公司

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