一种脑转移相关基因的CRISPR/Cas9文库高通量筛选方法.pdfVIP

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2023-06-10 发布于四川
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一种脑转移相关基因的CRISPR/Cas9文库高通量筛选方法.pdf

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本发明公开了一种脑转移相关候选基因的CRISPR/Cas9文库高通量筛选方法，该方法包括构建脑转移相关基因的sgRNA文库，将sgRNA文库进行慢病毒包装，感染稳定表达CAS9蛋白的宿主细胞，并筛选以获得稳定表达sgRNA文库的细胞，然后，将慢病毒感染后的细胞接种于免疫缺陷的小鼠颅内及脂肪垫，最后，将颅内成瘤及皮下成瘤的肿瘤组织取出，提取基因组DNA后，对sgRNA的靶向区进行二代测序建库，通过筛选前后sgRNA的丰度变化，进而找出脑转移相关候选基因。该方法建立了脑转移相关基因高通量筛选技术，能

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112921072 A (43)申请公布日 2021.06.08 (21)申请号 202110390689.3 (22)申请日 2021.04.12 (71)申请人复旦大学附属肿瘤医院

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