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本发明适用于生物技术领域,提供了一种高产核酸片段的制备方法,该制备方法包括以下步骤:在目标基因序列的5´和3´端分别引入同一个限制性内切酶的识别位点,以便经单一酶切获取目的基因片段,并保证片段的均一性;利用酶切、连接方式将目的基因片段与载体骨架连接成一种含有至少2Copy的目的基因片段的重组质粒。扩增并收集重组质粒,利用单一限制性内切酶酶切重组质粒,得到酶切液;将酶切液利用AKTA经阴离子交换树脂分离纯化,获得目的基因片段。该方法实现了单一批次目的基因片段的高产出,降低了发酵及纯化的规模和批次量
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 112921030 A
(43)申请公布日 2021.06.08
(21)申请号 202110396644.7
(22)申请日 2021.04.13
(71)申请人 江苏耀海生物制药有限公司
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