YC_T 501-2014 烟草及烟草制品 游离态甾醇的测定 高效液相色谱－串联质谱法.docx

ICS 65:160 X 85 备案号：45966-2014 中 华 人 民 共 和 国 烟 草 行 业 标 准 YC/T 501—2014 烟草及烟草制品 游离态甾醇的测定 高效液相色谱-串联质谱法 Tobacco and tobacco products—Determination of free sterol— High performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry method 2014-06-11 发布 2014-07-15实施 国家烟草专卖局 发 布 I YC/T 501—2014 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家烟草专卖局提出。 本标准由全国烟草标准化技术委员会卷烟分技术委员会(SAC/TC144/SC1) 归口。 本标准起草单位：云南烟草科学研究院。 本标准主要起草人：杨光宇、段沅杏、刘巍、刘志华、王岚、韩敬美、张霞、刘春波、张承明、陈永宽、 缪明明。 1 YC/T 501—2014 烟草及烟草制品 游离态甾醇的测定 高效液相色谱-串联质谱法 1 范围 本标准规定了烟草及烟草制品中游离态甾醇(麦角甾醇、胆甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇)的高 效液相色谱-串联质谱测定方法。 本标准适用于烟草及烟草制品中游离态甾醇(麦角甾醇、胆甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇)的 测定。 本方法测定烟草及烟草制品中游离态的麦角甾醇、胆甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇的检出限分 别为：0.29 mg/kg,0.08 mg/kg,0.14 mg/kg,0.58 mg/kg,0.66 mg/kg;定量限分别为：0.97 mg/kg: 0.28 mg/kg,0.47 mg/kg,1.95 mg/kg,2.21 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 YC/T 31 烟草及烟草制品 试样的制备和水分测定 烘箱法 3 原理 用萃取液萃取烟草及烟草制品样品中的游离态麦角甾醇、胆甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇，高 效液相色谱-串联质谱法检测，6-酮胆甾烷醇为内标进行定量分析。 4 试剂和材料 4.1 水 符合 GB/T 6682 中一级水的要求。 4.2 甲醇 色谱纯。 4.3 麦角甾醇标准品(C2?H4O,CAS:57-87-4) 纯度≥99%。 4.4 胆甾醇标准品(CzH46O,CAS:57-88-5) 纯度≥95% 2 YC/T 501—2014 4.5 菜油甾醇标准品(C?8H?8O,CAS:474-62-4) 纯度≥95%。 4.6 豆甾醇标准品(C2gH?8O,CAS:83-48-7) 纯度≥95%。 4.7 -谷甾醇标准品(C?9H?oO,CAS:83-46-5) 纯度≥98%。 4.8 6-酮胆甾烷醇标准品(C?H??O? ,CAS:1175-06-0) 纯度≥98%。 4.9 内标溶液 4.9.1 内标储备液 称取约50 mg 6-酮胆甾烷醇(4.8)于100 mL 棕色容量瓶中，精确至0.0001 g,用甲醇(4.2)溶解并 稀释至刻度，配制成浓度约为0.50 mg/mL 的内标储备液。该内标储备液在2℃~8℃下密封避光保 存，有效期为1个月。 4.9.2 内标工作溶液 移取1.0 mL6- 酮胆甾烷醇内标储备液(4.9.1)至25 mL 棕色容量瓶中，用甲醇(4.2)稀释至刻度，配 制成浓度约为20.0μg/mL 的内标工作溶液，该溶液应即配即用。 4.10 萃取溶液 移取8.0 mL 内标工作溶液(4.9.2)于1000 mL 容量瓶中，用甲醇(4.2)稀释至刻度，该萃取溶液应 即配即用。 4.11 标准溶液 4.11.1 标准储备液 分别准确称取50 mg 麦角甾醇(4.3)、胆甾醇(4.4)、菜油甾醇(4.5)、豆甾醇(4.6)、β-谷甾醇(4.7)置 于不同的100 mL 棕色容量瓶中，精确至0.0001 g,用甲醇(4.2)溶解并稀释至刻度，配制成浓度为 0.50mg/mL 的标准储备溶液。该标准储备溶液在2℃~8℃下密封避光保存，有效期为1个月。 4.11.2 一级混合标准溶液 分别准确移取麦角甾醇、胆甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇的标准储备溶液(4.11.1)0.5 mL、