YC_T 471-2013 烟草及烟草制品 麦角甾醇的测定 气相色谱-质谱联用法.docx

ICS 65.160 X 87 备案号：39852—2013 中 华 人 民 共 和 国 烟 草 行 业 标 准 YC/T 471—2013 烟草及烟草制品 麦角甾醇的测定 气相色谱-质谱联用法 Tobacco and tobacco products—Determination of ergosterol— Gas chromatography-mass spectrometry method 2013-02-28发布 2013-03-15实施 国家烟草专卖局 发 布 I YC/T 471-2013 前 言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家烟草专卖局提出。 本标准由全国烟草标准化技术委员会卷烟分技术委员会(SAC/TC 144/SC1)归口。 本标准起草单位：上海烟草集团有限责任公司、国家烟草质量监督检验中心、云南烟草科学研究院、 广东中烟工业有限责任公司、安徽中烟工业有限责任公司、山东中烟工业有限责任公司、山东省烟草专 卖局(公司)。 本标准主要起草人：林华清、沙云菲、戚大伟、黄海涛、刘彤、汪军霞、张晓宇、于宏晓、张福民、吴达、 李峰、周显升、边振英、田振峰、楼佳颖、王亮、王嘉乐、曾令杰、陈敏、钟青。 1 YC/T 471—2013 烟草及烟草制品 麦角甾醇的测定 气相色谱-质谱联用法 1 范围 本标准规定了烟草及烟草制品中麦角甾醇的气相色谱-质谱联用测定方法。 本标准适用于烟草及烟草制品中麦角甾醇的测定。 本方法测定烟草及烟草制品中麦角甾醇的检出限为0.5 mg/kg, 定量限为1.5 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 YC/T 31 烟草及烟草制品 试样的制备和水分测定 烘箱法 3 原理 烟草及烟草制品样品经水解溶液皂化、双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺衍生后，使用气相色谱-质谱 联用仪，采用同步特征选择离子监测/全扫描模式(SIM/SCAN), 以保留时间与碎片的丰度比定性，内 标法进行定量测定。 4 试剂 除特殊要求外，所用试剂均为色谱纯级试剂，水应符合GB/T 6682 中一级水的规定。 4.1 甲醇。 4.2 正己烷。 4.3 氢氧化钠，分析纯。 4.4 麦角甾醇，(C?H?O,CAS:57-87-4), 纯度≥99%。 4.5 7-去氢胆固醇(CzrH44O,CAS:434-16-2, 内标),纯度≥99%。 4.6 双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(C?H??F?NOSi? ,CAS:25561-30-2,BSTFA), 纯度≥99% 4.7 水解液 称取50.0 g 氢氧化钠(4.3),加入50 mL 水，搅拌使氢氧化钠充分溶解，然后加入950 mL 甲醇 (4.1),混匀。 4.8 标准溶液 4.8.1 标准储备液 准确称取100 mg 麦角甾醇(4.4)于100 mL 容量瓶中，精确至0.1 mg, 用甲醇(4.1)定容至刻度， 配成1 mg/mL 的标准储备液。该储备液4℃冰箱避光保存，有效期为1个月。 4.8.2 内标储备液 准确称取100 mg 7-去氢胆固醇(4.5)于1000 mL 容量瓶中，精确至0.1 mg, 用甲醇(4.1)定容至 2 YC/T 471—2013 刻度，配成0.1 mg/mL 的内标储备液。该内标储备液4℃冰箱避光保存，有效期为3个月。 4.8.3 系列标准工作溶液 根据需要配制合适浓度的系列标准工作溶液待用。推荐如下配制方法：分别移取20 μL、50 μL、 100μL、200μL、500 μL、1000μL、2000μL标准储备液(4.8.1)于10 mL 容量瓶中，用甲醇(4.1)定容 至刻度，即得系列标准工作溶液。 5 仪器与设备 5.1 样品粉碎装置：旋转式电动粉碎机。 5.2 分析天平：感量0.1 mg。 5.3 15 mL、50mL具盖玻璃试管。 5.4 水浴锅：温度可达到80℃,控温精度±1℃。 5.5 涡旋振荡器：转速可达3000 r/min。 5.6 气相色谱-质谱联用仪，具有选择离子检测(SIM) 功能。 5.7 弹性毛细管柱；固定相：5%苯基/95%甲基聚硅氧烷；规格30 m (长度)×0.25 mm (内径)× 0.25 μm(膜厚)。 5.8 离心机，最大转速应不小于